重点推介:AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)

重点推介:AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)

AcceGen是美国领xian的生物技术公司,致力于为细胞生物学、生物制药、生物技术等领域提供高质量的原代细胞、肿瘤细胞系、干细胞、永生化细胞、转染稳定细胞等细胞类产品。

Vero细胞是一种从非洲绿猴的肾上皮中分离出的细胞系。它们常用于生产许多病毒疫苗,如脊髓灰质炎疫苗、埃博拉病毒疫苗和黄热病疫苗等。Vero细胞具有良好的感染性,并在无血清培养条件下生长,适宜进行大规模培养。由于细胞株的稳定性和较低的变异性,Vero细胞是疫苗生产中的常用细胞。Vero细胞来源方便,容易建立细胞库和保存,可连续传代,生长速度快;遗传性状稳定,恶性化概率小,无外源性污染,具有良好的生物安全特性;对多种病毒敏感,生产的病毒滴度高;对培养条件要求不高,在微载体表面能良好的贴附生长,易在生物反应器放大培养;Vero 细胞系可无限传代,从而可用于广泛的细胞特性和大型细胞库的创建。下面让我们一起来看看AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273)的产品属性吧!

物种:非洲绿猴;

产品类型:猴肾细胞系;

细胞类型:上皮细胞;

生物安全等级:一级;

运输方式:干冰运输;

推荐培养基和补充剂:MEM + 10% FBS

应用:仅供研究使用。Vero细胞广泛应用于细菌毒素和病毒的筛选。Vero细胞谱系在寄生虫研究和生物制药研究中也发挥着极其重要的作用,如多病原体研究和疫苗生产。纯化Vero细胞狂犬病疫苗(PVRV)是WHO批准的细胞培养疫苗之一。

上海金畔生物科技有限公司重点推介AcceGen非洲绿猴肾细胞Vero细胞(ABC-TC1273),欢迎选购!

【干货】一文了解vero细胞培养全流程

【干货】一文了解vero细胞培养全流程

Vero细胞系是连续非整倍体细胞,连续细胞系可以经过多次分裂而不衰老,非整倍体是指细胞中的染色体数目与通常的不同。与其它普通哺乳动物细胞不同,Vero细胞还有干扰素分泌缺陷的特点,当被病毒感染时,它不能分泌干扰素,但它仍然具有α/β-干扰素的受体,所以对于其它来源的干扰素仍有正常的反应。

一、基本信息

细胞名称:Vero非洲绿猴肾细胞

细胞别称:VERO; Verda reno

细胞形态:上皮细胞样

生长特性:贴壁生长

组织来源:正常肾

培养基:MEM+10%FBS+1%PS

生长条件:

气相:95%空气+5%二氧化碳;

温度:37℃

传代方法:1:21:3,每周2-3次。

二、培养指南

1. Vero细胞复苏步骤

(1)1mL Vero细胞悬液冻存管于37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基进行混合均匀;

(2)1000rpm条件下离心4min,弃上清液,再加入1-2mL培养基后轻轻吹打混匀;

(3)Vero细胞悬液加入到含有适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入到6cm皿中,加入约4mL的培养基,培养过夜);

(4)第二天换液并观察Vero细胞密度。

2. Vero细胞传代步骤

Vero细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

(1)1mL Vero猴肾细胞悬液冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀;

(2)1000rpm条件下离心4min,弃上清液,再加入1-2mL培养基后吹打混匀;

(3)Vero猴肾细胞胞悬液加入到含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入到6cm皿中,加入约4mL培养基,培养过夜);

(4)第二天换液并观察Vero细胞密度。

3. Vero细胞冻存步骤

Vero细胞生长状态良好,可进行细胞冻存。以T25瓶为例:

(1)收集Vero细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,于1000rpm条件下离心4min,弃上清液,用PBS清洗一遍,弃掉PBS后进行细胞计数。

(2)根据Vero细胞数量对应加入无血清细胞冻存液,使细胞密度在5×106~1×107/mL之间,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管上做好标识。

(3)将冻存管放入-80℃冰箱中,24h后转入液氮灌储存。

三、注意事项

1. 培养基不能回收使用

灌液培养基不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。

2. 细胞到货处理说明

(1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。

(2)观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h

(3)收到Vero细胞后第一次传代建议1:2传代,1:2传代是指1T25瓶传2T25瓶或者26cm皿,而不是1T25瓶传210cm皿。

四、常见问题

1. vero细胞培养出现小黑点?

处理方法:在细胞消化离心弃上清后,使用PBS重悬洗涤,在750rpm条件下低速离心4min,重新铺下,然后镜下观察是否干净。

2. vero细胞生长过慢?

(1)更换不同培养基或血清导致

解决方法:分析新培养基与原培养基的成分,比较新血清与原血清支持细胞生长实验,让细胞逐渐适应新培养基。

(2)有少量细菌或真菌污染

解决方法:用含抗生素培养液培养,如发现污染,尽量丢弃培养物。

(3)试剂保存不当导致

解决方法:血清需要保存在-10-20℃

培养基需在2-8℃避光保存;

含血清wan全培养液在2-8℃保存。

(4)接种细胞起始浓度太低

解决方法:增加接种细胞起始浓度。

(5)细胞已老化

解决方法:引入新的保种细胞,重新培养。

(6)支原体污染

解决方法:吸取部分培养基,离心得上清,检测支原体;

清洁支架和培养箱;

可在培养皿里加入支原体去除剂清除;

如发现支原体污染,建议尽量丢弃。

3. vero细胞培养过程中不贴壁?

(1)胰酶消化过度导致

解决方法:尝试缩短胰酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。

(2)支原体污染

解决方法:吸取培养2-3的培养基,检测支原体;

清洁支架和培养箱;

 如发现支原体污染,丢弃培养物。

(3)培养基pH值过碱(NaHCO3分解)

解决方法:使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2

(4)细胞老化

解决方法:购买新的代数较低的细胞。

(5)接种细胞起始浓度太低或太高

解决方法:调节最佳接种细胞浓度。

4. vero细胞用什么培养基?

vero细胞培养基:MEM+10%FBS+1%P/S

5. vero细胞DMSO冻存比例?

冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配或无血清细胞冻存液。

更多有关vero细胞培养知识,请咨询上海金畔客服。