UE基因组DNA小量制备试剂盒 货号: UE-MN-MS-GDNA-50/UE-MN-MS-GDNA-250 规格: 50T/250T

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UE基因组DNA小量制备试剂盒

产品货号: UE-MN-MS-GDNA-50/UE-MN-MS-GDNA-250

产品规格: 50T/250T

目录价(元):685.2/3167.3

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产品概述:

储存条件
Minprep column: 小量制备管。室温密闭贮存。
RNase A: 50 mg/ml, 室温保存。
Buffer C-L: 裂解液,室温密闭贮存。
Proteinase K: 冻干的蛋白酶K可室温贮存6个月,长时间保存请置于4: 溶解后,在2-8℃可贮存2个月,长时间保存请勿置于室温中。
Buffer PK: 蛋白酶K溶解液,室温密闭贮存。
Buffer P-D: 蛋白去除液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇,混合均匀,室温密闭贮存。可用100%乙醇或95%乙醇。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 室温密闭贮存。

UE基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-MS-GDNA-50/UE-MN-MS-GDNA-250  规格:               50T/250T


流程图

UE基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-MS-GDNA-50/UE-MN-MS-GDNA-250  规格:               50T/250T


说明书:

UE基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-MS-GDNA-50/UE-MN-MS-GDNA-250  规格:               50T/250T UE-UE-MN-MS-GDNA-50/UE-MN-MS-GDNA-250    
常见问题解答:

洗脱产物的DNA量很少或没有
·所提样品材料老化或反复冻融导致基因组DNA含量下降
应选择新鲜的样品材料,如新鲜血液、新鲜菌液、刚离体的动物组织或幼嫩的植物组织等,不能及时处理的样品应立即放入液氮或-70℃低温保存,以免DNA降解。
·样品过多导致细胞处理不完全
样品破壁或裂解不完全导致基因组DNA未充分释放动、植物材料应在液氮中充分研磨匀浆
·DNA洗脱效率不高
W2中没有加无水乙醇或者使用了低浓度的乙醇代替无水乙醇。最后一次buffer W2洗涤完后不要将制备管放于负压装置上抽的过干。洗脱液pH值过低会降低洗脱效率,应确保洗脱液pH值7.0-8.5之间;洗脱时可将洗脱缓冲液在65℃水浴预热,加入洗脱液后在室温静置2-5分钟,可提高洗脱效率,提高基因组DNA的产量。

A260/280比值过低
·样品量过多导致细胞裂解不充分
样品量过多从而导致样品裂解不彻底,残留大量蛋白、多糖、脂类等杂质,为后续吸附柱分离纯化造成影响。应加入适当量的样品材料。

RNA污染 (A260/280比值偏高)
·RNase A可能失活
RNase A需按照说明书或者标签指示保存。低温保存时RNase A比较稳定,不易失活,但如果反复冻融会导致RNase A降解失活,所以应妥善保存。
忘记使用RNase A

基因组DNA有降解
·完全降解的基因组DNA在凝胶电泳上会出现模糊的条带或者是拖尾现象
选取的材料不新鲜或反复冻融,采集材料后未及时处理或未低温保存。陈旧血液、老化菌液等不新鲜的材料中,细胞凋亡导致DNA降解,或低温保存的样品反复冻融导致细胞破碎,内源核酸酶降解DNA,因此应选择新鲜的材料样品,不能及时处理则低温保存,运输过程中亦应使用干冰。
·未能有效抑制内源核酸酶作用
某些DNase含量较丰富的动、植物组织样品应在液氮中研磨或匀浆,研磨过程中应随时补充液氮,并在样品未完全解冻前即加入含有抑制核酸酶作用的鳌合剂的裂解液。
·操作过于剧烈导致DNA被机械打断。

基因组DNA酶反应效果不佳
·DNA纯度低
样品过多导致裂解不充分,从而引起大量蛋白、多糖、脂类等杂质残留,影响后续酶切反应效果。可适当减少样品初始量。
·盐分污染
可以用2× Buffer W2进行洗涤
·乙醇污染
在最后一次 Buffer W2 洗涤后可将制备管由原来离心1min增加至离心2min。

制备管堵孔
·样品过多
·裂解不充分

UE质粒中量制备试剂盒 货号: UE-MD-P-10/UE-MD-P-25 规格: 10T/25T

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UE质粒中量制备试剂盒

产品货号: UE-MD-P-10/UE-MD-P-25

产品规格: 10T/25T

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产品概述:

储存条件
RNase A: 50 mg /ml,室温贮存6个月;长期贮存于-20℃。
Buffer S1: 细菌悬浮液。加入RNase A后,混合均匀,4贮存。
Buffer S2: 细菌裂解液(含SDS/NaOH)。室温密闭贮存。
Buffer S3K : 中和液,室温密闭贮存。
Buffer B: DNA结合溶液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent : 洗脱液 室温密闭贮存。

UE质粒中量制备试剂盒 货号:               UE-MD-P-10/UE-MD-P-25  规格:               10T/25T

流程图
UE质粒中量制备试剂盒 货号:               UE-MD-P-10/UE-MD-P-25  规格:               10T/25T


说明书:

UE质粒中量制备试剂盒 货号:               UE-MD-P-10/UE-MD-P-25  规格:               10T/25T UE-UE-MD-P-10/UE-MD-P-25    
常见问题解答:

同样体积的新鲜菌液,为什么有些提取的质粒浓度高,而有些质粒的浓度低?这些情况应该如何处理?
质粒提取高低的一个重要决定性因素是质粒载体的拷贝数,即质粒在一个大肠杆菌中的数目。对于低拷贝数的质粒,需要适当增加菌液的收集量,详情请参阅说明书。
以下是几种常见载体的拷贝数:
UE质粒中量制备试剂盒 货号:               UE-MD-P-10/UE-MD-P-25  规格:               10T/25T

使用UE质粒中量制备试剂盒时,在DNA结合/洗涤步骤中能否使用离心法?
不建议使用。UE质粒中量制备试剂盒中的质粒制备管不能与常规的15ml,50ml离心管配套,所以无法使用。您可以通过使用负压装置来解决这一问题。如果无法取得相配套的负压装置,可以尝试手推过滤器的方式进行,但这样的操作容易引起污染。

我提取的质粒为什么会有基因组条带?
菌体在裂解和中和过程中如果操作过于剧烈就容易引起基因组污染。加入Buffer S2后要轻柔混匀,加入Buffer S3后混合均匀。如果发现裂解物在操作过程中过于黏稠,需要适当降低菌体的用量。

我提取的质粒在电泳图片上看,有一条紧挨着主带的小条带请问这是什么原因?如何判定它是否是杂带?
那条带很有可能就是变性条带。如果在加入Buffer S2后没有及时混匀菌体,会导致菌体局部碱性过强,破坏质粒的结构,在加入Buffer S3后质粒无法完全复性,就产生了这样的变性条带。
检测的方式是通过酶切检测,如果这条带在酶切后依然存在,则是变性条带,如果酶切后消失,则可能是质粒的不同状态。

我提取的质粒有明显的RNA污染,请问是什么原因?
可能有以下两种可能:
1、RNase A活力下降。Buffer S1在加入RNase A后要保存在4℃冰箱。如果室温放置,RNase A活力会下降,导致RNA污染。
2、菌体过量。如果使用的菌体量过多,也可能导致RNA污染。适当减少菌体的用量。

质粒得率很低,请问是什么原因?
质粒低的可能因素很多,以下是几种可能原因:
1、菌体过量,导致菌体不能完全裂解和中和,最终导致质粒得率低。
2、Buffer W2中未按瓶子上得标注体积加入乙醇。
3、菌体老化,影响提取的效果。建议对菌液进行划板培养,筛选新鲜克隆。

请问Eluent Buffer的配方是什么?对于DNA测序有没有影响?
Eluent Buffer 的配方是2.5mM Tris-HCl,pH8.0。质粒在这样的溶液中能够稳定保存,而且测序不受影响。

UE PCR清洁试剂盒 货号: UE-PCR-50/UE-PCR-250/UE-PCR-500 规格: 50T/250T/500T

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UE PCR清洁试剂盒

产品货号: UE-PCR-50/UE-PCR-250/UE-PCR-500

产品规格: 50T/250T/500T

目录价(元):310.5/1387.3/2326.9

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产品概述:

储存条件
Buffer PCR-A:DNA结合溶液。室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%无水乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 洗脱液,室温密闭贮存。

UE PCR清洁试剂盒 货号:               UE-PCR-50/UE-PCR-250/UE-PCR-500  规格:               50T/250T/500T

流程图

UE PCR清洁试剂盒 货号:               UE-PCR-50/UE-PCR-250/UE-PCR-500  规格:               50T/250T/500T

说明书:

UE PCR清洁试剂盒 货号:               UE-PCR-50/UE-PCR-250/UE-PCR-500  规格:               50T/250T/500T UE-UE-PCR-50/UE-PCR-250/UE-PCR-500    
常见问题解答:

得率低或者得不到DNA
·Buffer W2中没有加入乙醇
Buffer W2在使用之前必需加入100%或者95%的乙醇。
·不合适的洗脱液
DNA只能在低盐和pH7.0的条件下有效的洗脱。应使用试剂盒提供的洗脱液或者用水(pH7.0)洗脱。在65℃下预热洗脱液可以提高洗脱效率。
·洗脱液体积不够或者没有浸润膜
洗脱液应加在制备膜的中央以确保其均匀的浸润整个膜。
·采用不合适的负压装置
确保负压保持在 -25至-30英尺汞柱。

DNA不能很好地用于下游实验
·洗脱时盐浓度过高 
确保在洗脱之前盐分都被洗涤去除。正确使用Buffer W1,避免在管体上残留。
·样品上样电泳时样品跑出胶孔
洗脱液中残留有乙醇(样品会飘在琼脂糖凝胶孔中)
仔细的操作说明书中的所有步骤以去除残留的乙醇。
·洗脱液中含有引物二聚体
引物二聚体会影响后续的反应,如测序。任何大于40bp的引物二聚体都将不会被完全去除。结合完后,用750ul盐酸胍(35g盐酸胍溶于100ml去离子水)洗涤UE PCR清洁制备管或者制备板,然后再接着进行说明书中所述的洗涤洗脱步骤。
·洗脱液中含有变性的单链DNA,这在凝胶电泳中可见一条又小又淡又糊的条带
洗脱后,将洗脱液在95℃中温浴2min。在使用前冷却至室温。95℃温浴2min后也可以在洗脱液中加入10 mM NaCl以促进复性。

UE无内毒素质粒大量试剂盒 货号: UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25 规格: 10T/25T

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UE无内毒素质粒大量试剂盒

产品货号: UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25

产品规格: 10T/25T

目录价(元):1705.1/3867.3

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产品概述:

储存条件
RNase A: 50 mg/ml, 室温可贮存6个月,长期贮存于-20℃。
Buffer S1: 细菌悬浮液。加入RNaseA后,混合均匀,4贮存。
Buffer S2: 细菌裂解液(含SDS/NaOH), 室温密闭贮存。
Buffer S3K: 中和液,室温密闭贮存。
Buffer B: DNA结合溶液,室温密闭贮存。
BufferW1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用无水乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
ET-free water (70% Ethanol): 使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇 (可用无水乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent A: 洗脱液。室温密闭贮存。
Buffer ETR: 内毒素去除液。室温密闭贮存。
Buffer PF: 分相缓冲液。室温密闭贮存。

UE无内毒素质粒大量试剂盒 货号:               UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25  规格:               10T/25T

流程图

UE无内毒素质粒大量试剂盒 货号:               UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25  规格:               10T/25T

说明书:

UE无内毒素质粒大量试剂盒 货号:               UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25  规格:               10T/25T UE-UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25    
常见问题解答:

同样体积的新鲜菌液,为什么有些提取的质粒浓度高,而有些质粒的浓度低?这些情况应该如何处理?
质粒提取高低的一个重要决定性因素是质粒载体的拷贝数,即质粒在一个大肠杆菌中的数目。对于低拷贝数的质粒,需要适当增加菌液的收集量,详情请参阅说明书。
以下是几种常见载体的拷贝数:
UE无内毒素质粒大量试剂盒 货号:               UE-MX-EP-10/UE-MX-EP-25  规格:               10T/25T

我提取的质粒为什么会有基因组条带?
菌体在裂解和中和过程中如果操作过于剧烈就容易引起基因组污染。加入Buffer S2后要轻柔混匀,加入Buffer S3后混合均匀。如果发现裂解物在操作过程中过于黏稠,需要适当降低菌体的用量。

我提取的质粒在电泳图片上看,有一条紧挨着主带的小条带请问这是什么原因?如何判定它是否是杂带?
那条带很有可能就是变性条带。如果在加入Buffer S2后没有及时混匀菌体,会导致菌体局部碱性过强,破坏质粒的结构,在加入Buffer S3后质粒无法完全复性,就产生了这样的变性条带。
检测的方式是通过酶切检测,如果这条带在酶切后依然存在,则是变性条带,如果酶切后消失,则可能是质粒的不同状态。

我提取的质粒有明显的RNA污染,请问是什么原因?
可能有以下两种可能:
1、RNase A活力下降。Buffer S1在加入RNase A后要保存在4℃冰箱。如果室温放置,RNase A活力会下降,导致RNA污染。
2、菌体过量。如果使用的菌体量过多,也可能导致RNA污染。适当减少菌体的用量。

质粒得率很低,请问是什么原因?
质粒低的可能因素很多,以下是几种可能原因:
1、菌体过量,导致菌体不能完全裂解和中和,最终导致质粒得率低。
2、Buffer W2中未按瓶子上得标注体积加入乙醇。
3、菌体老化,影响提取的效果。建议对菌液进行划板培养,筛选新鲜克隆。

请问Eluent Buffer的配方是什么?对于DNA测序有没有影响?
Eluent Buffer 的配方是2.5mM Tris-HCl,pH8.0。质粒在这样的溶液中能够稳定保存,而且测序不受影响。

UE血基因组DNA大量制备试剂盒 货号: UE-MX-BL-GDNA-10/UE-MX-BL-GDNA-25 规格: 10T/25T

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UE血基因组DNA大量制备试剂盒

产品货号: UE-MX-BL-GDNA-10/UE-MX-BL-GDNA-25

产品规格: 10T/25T

目录价(元):1265.9/2326.9

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产品概述:

储存条件
Buffer VL: 细胞和病毒裂解液,室温密闭贮存。
Buffer G-B: 蛋白沉淀液,室温密闭贮存。
Buffer DV-A: Buffer DV的制备液(请参照实验准备BufferDV配制),室温密闭贮存。
Buffer DV: 相分离液,室温密闭贮存。
Buffer BV: DNA结合液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 室温密闭贮存。

UE血基因组DNA大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-BL-GDNA-10/UE-MX-BL-GDNA-25  规格:               10T/25T

流程图

UE血基因组DNA大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-BL-GDNA-10/UE-MX-BL-GDNA-25  规格:               10T/25T
说明书:

UE血基因组DNA大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-BL-GDNA-10/UE-MX-BL-GDNA-25  规格:               10T/25T UE-UE-MX-BL-GDNA-10/UE-MX-BL-GDNA-25    
常见问题解答:

得率低或者得不到DNA
血液中白细胞的含量低
样品与VL没有充分的混匀
下相液体被上相液体污染减少了DNA与制备膜的结合
DNA过早的从膜上脱落。Buffer W2中没有加无水乙醇或者用低浓度的乙醇代替了无水乙醇。
DNA没有有效的被洗脱。可先将洗脱液于65℃预热。

低 A260/280
样品与VL没有充分的混匀
样品与DV没有充分的混匀
样品中白细胞的数量过多
血的用量过多

基因组降解
根据降解的完整性,在琼脂糖凝胶电泳中基因组DNA要么呈现一条糊状条带要么是大分子量条带前的一个拖尾现象。在这个纯化过程中任何的物理作用都不会有效的造成视觉上可见的降解,引起这种情况的大多数可能来源于酶。酶引起的降解可能是血样品长时间或者不当的储存导致的。

酶反应效果差
盐分污染
乙醇污染

过滤器阻塞
样品中白细胞含量升高
将过多的相间残留物质移入过滤器中

UE-96体液病毒DNA/RNA纯化试剂盒 货号: UE-96-BF-VNA-4/UE-96-BF-VNA-12 规格: 4T/12T

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UE-96体液病毒DNA/RNA纯化试剂盒

产品货号: UE-96-BF-VNA-4/UE-96-BF-VNA-12

产品规格: 4T/12T

目录价(元):10967.2/26323

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产品概述:

储存条件
Proteinase K: 冻干的蛋白酶K可室温贮存6个月,长时间保存请置于4; 溶解后,在2-8可贮存2个月,长时间保存请勿置于室温中。

PK Buffer: 蛋白酌K溶解液,室温密闭贮存。
Buffer AVL: 病毒裂解液,4℃贮存。
BufferW1A: 洗涤液,使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。 使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer TE (nuclease-free): 洗脱液。无DNA/RNA酶活性。
96-well VNA plate: 96孔制备板。

UE-96体液病毒DNA/RNA纯化试剂盒 货号:               UE-96-BF-VNA-4/UE-96-BF-VNA-12  规格:               4T/12T

流程图

UE-96体液病毒DNA/RNA纯化试剂盒 货号:               UE-96-BF-VNA-4/UE-96-BF-VNA-12  规格:               4T/12T
说明书:

UE-96体液病毒DNA/RNA纯化试剂盒 货号:               UE-96-BF-VNA-4/UE-96-BF-VNA-12  规格:               4T/12T UE-UE-96-BF-VNA-4/UE-96-BF-VNA-12    
常见问题解答:

PCR或者RT-PCR扩增多条带/片段大小不对
考虑操作环境中的污染,如试剂、塑料耗材等。做一个阴性对照,确定扩增出有正确条带的多带污染的来源(塑料/试剂)。

PCR扩增不出
·引物、试剂或者是退火温度等设置的问题
做质控,确认原因。
·忘记在Buffer W2中加乙醇。
确认加入的是100%乙醇或者95%乙醇。如果对Buffer W2有疑问 ,可以用70%乙醇临时代替检验结果。
·病毒滴度低
尽量提高病毒的使用量,重新PCR。增加PCR循环数。设置阳性质控。
·病毒DNA降解
由于病毒在生物样本中的含量往往很低,并且处理要很小心。在操作时尽量去除可能影响病毒得率的污染源。

RT-PCR扩增不出条带
·病毒滴度低
尽量提高RNA病毒的量,重新RT-PCR。提高RT-PCR循环数。设置阳性质控。
·RNA病毒降解
由于病毒在生物样本中的含量往往很低,并且处理要很小心。在操作时尽量去除可能影响病毒得率的污染源。比如使用经过DEPC处理过的材料。加入RNasin(1unit/ul)到纯化好的RNA病毒中也可以提高RNA的稳定性。
·引物、试剂或者是退火温度等设备问题

病毒DNA/RNA产量低或没有DNA/RNA洗脱下来
·高水平的RNA酶活性导致RNA降解
严格按照RNA提取注意事项创造无DNA/RNA酶环境,得到的DNA/RNA产物应该立刻使用或者保存在-80℃。
·蛋白酶K失效或者消化不完全
收到蛋白酶K后,充分溶解,按照每次使用量分装冻存,避免反复冻融。
·DNA/RNA仍在柱子上。
重复洗脱。
洗脱前将DEPC水预热到70℃。
离心前将DEPC水加入柱子膜中央,使洗脱液完全浸润制备膜,并静置5min。
·柱子吸附量超载。
减少加入柱子中的样品量。
增加蛋白酶K消化时间。
·Buffer W2中未加无水乙醇。
检查试剂瓶标签并在Buffer W2中加入正确体积的无水乙醇。

DNA/RNA降解
·样本有问题。
样品应该保存在液氮或者-80℃直到使用,不能反复冻融。
严格按照操作说明书快速提取RNA。
样本本身病毒RNA含量低。
·DNA/RNA酶污染
严格按照RNA提取注意事项创造无RNA酶环境,确保在操作中未引入RNA酶。
检查溶液是否有RNA酶污染。

低核酸产量或者纯度不高
·试剂盒储存在非最佳条件
收到试剂盒后总是存放在室温(15℃-20℃)。
·缓冲液或者试剂暴露于减少它们有效性的条件下
储存在室温(15℃-20℃)每次用完后立刻盖紧盖子,以免溶液蒸发、PH改变和污染。
·缓冲液Buffer W2中忘记加无水乙醇
第一次实验时,在缓冲液Buffer W2中加入指定量无水乙醇。
·试剂和样品没有充分混匀
加入每个试剂后都要充分混匀。
·蛋白酶K失效或者消化不完全
收到蛋白酶K后,充分溶解,按照每次使用量分装冻存,避免反复冻融。
·洗脱效率不高
确保缓冲液Buffer W2已清除干净,否则残留乙醇会影响洗脱效率 ,仔细阅读洗脱操作步骤。

纯化的DNA/RNA产物OD260数值异常偏高
·一些硅基质膜成分一起洗脱下来,干扰了分光光度计读数
建议:将洗脱的回收DNA/RNA溶液12,000×g再离心一分钟,小心取上清使用。

UE质粒大量制备试剂盒 货号: UE-MX-P-10/UE-MX-P-25 规格: 10T/25T

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UE质粒大量制备试剂盒

产品货号: UE-MX-P-10/UE-MX-P-25

产品规格: 10T/25T

目录价(元):1367.3/2775.6

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产品概述:

储存条件
RNase A: 50 mg/ml, 室温贮存6个月;长期贮存于-20
Buffer S1: 细菌悬浮液,加入RNase A后,混合均匀,4℃贮存。
Buffer S2: 细菌裂解液(含SDS/NaOH), 室温密闭贮存。
Buffer S3K: 中和液,室温密闭贮存。
Buffer B: DNA结合溶液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5。室温密闭贮存。

UE质粒大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-P-10/UE-MX-P-25  规格:               10T/25T

流程图

UE质粒大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-P-10/UE-MX-P-25  规格:               10T/25T


说明书:

UE质粒大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-P-10/UE-MX-P-25  规格:               10T/25T UE-UE-MX-P-10/UE-MX-P-25    
常见问题解答:

同样体积的新鲜菌液,为什么有些提取的质粒浓度高,而有些质粒的浓度低?这些情况应该如何处理?
质粒提取高低的一个重要决定性因素是质粒载体的拷贝数,即质粒在一个大肠杆菌中的数目。对于低拷贝数的质粒,需要适当增加菌液的收集量,详情请参阅说明书。
以下是几种常见载体的拷贝数:
UE质粒大量制备试剂盒 货号:               UE-MX-P-10/UE-MX-P-25  规格:               10T/25T

使用UE质粒大量制备试剂盒时,在DNA结合/洗涤步骤中能否使用离心法?
可以,使用与离心机配套的离心管可以进行离心。

我提取的质粒为什么会有基因组条带?
菌体在裂解和中和过程中如果操作过于剧烈就容易引起基因组污染。加入Buffer S2后要轻柔混匀,加入Buffer S3后混合均匀。如果发现裂解物在操作过程中过于黏稠,需要适当降低菌体的用量。

我提取的质粒在电泳图片上看,有一条紧挨着主带的小条带请问这是什么原因?如何判定它是否是杂带?
那条带很有可能就是变性条带。如果在加入Buffer S2后没有及时混匀菌体,会导致菌体局部碱性过强,破坏质粒的结构,在加入Buffer S3后质粒无法完全复性,就产生了这样的变性条带。
检测的方式是通过酶切检测,如果这条带在酶切后依然存在,则是变性条带,如果酶切后消失,则可能是质粒的不同状态。

我提取的质粒有明显的RNA污染,请问是什么原因?
可能有以下两种可能:
1、RNase A活力下降。Buffer S1在加入RNase A后要保存在4℃冰箱。如果室温放置,RNase A活力会下降,导致RNA污染。
2、菌体过量。如果使用的菌体量过多,也可能导致RNA污染。适当减少菌体的用量。

质粒得率很低,请问是什么原因?
质粒低的可能因素很多,以下是几种可能原因:
1、菌体过量,导致菌体不能完全裂解和中和,最终导致质粒得率低。

2、Buffer W2中未按瓶子上得标注体积加入乙醇。

3、菌体老化,影响提取的效果。建议对菌液进行划板培养,筛选新鲜克隆。

请问Eluent Buffer的配方是什么?对于DNA测序有没有影响?
Eluent Buffer 的配方是2.5mM Tris-HCl,pH8.0。质粒在这样的溶液中能够稳定保存,而且测序不受影响。

UE无内毒素质粒小量试剂盒 货号: UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150 规格: 50T/150T

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UE无内毒素质粒小量试剂盒

产品货号: UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150

产品规格: 50T/150T

目录价(元):848.9/2163.3

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产品概述:

储存条件
RNase A:50 mg/ml,室温可贮存6个月,长期贮存于﹣20℃。
Buffer S1:细菌悬浮液。加入SNase A后,混合均匀,4℃贮存。
Buffer S2: 细菌裂解液(含SDS/NaOH),室温密闭贮存。
Buffer S3: 中和液,室温密闭贮存。
BufferW1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
ET-free water (70% ethanol): 使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
EluentA : 洗脱液。 室温密闭贮存。
Buffer ETR : 内毒素去除液。室温密闭贮存。
Buffer PF: 分相缓冲液。室温密闭贮存。

UE无内毒素质粒小量试剂盒 货号:               UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150  规格:               50T/150T

流程图

UE无内毒素质粒小量试剂盒 货号:               UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150  规格:               50T/150T
说明书:

UE无内毒素质粒小量试剂盒 货号:               UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150  规格:               50T/150T UE-UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150    
常见问题解答:

同样体积的新鲜菌液,为什么有些提取的质粒浓度高,而有些质粒的浓度低?这些情况应该如何处理?
质粒提取高低的一个重要决定性因素是质粒载体的拷贝数,即质粒在一个大肠杆菌中的数目。对于低拷贝数的质粒,需要适当增加菌液的收集量,详情请参阅说明书。
以下是几种常见载体的拷贝数:
UE无内毒素质粒小量试剂盒 货号:               UE-MN-EP-50/UE-MN-EP-150  规格:               50T/150T

我提取的质粒为什么会有基因组条带?
菌体在裂解和中和过程中如果操作过于剧烈就容易引起基因组污染。加入Buffer S2后要轻柔混匀,加入Buffer S3后混合均匀。如果发现裂解物在操作过程中过于黏稠,需要适当降低菌体的用量。

我提取的质粒在电泳图片上看,有一条紧挨着主带的小条带请问这是什么原因?如何判定它是否是杂带?
那条带很有可能就是变性条带。如果在加入Buffer S2后没有及时混匀菌体,会导致菌体局部碱性过强,破坏质粒的结构,在加入Buffer S3后质粒无法完全复性,就产生了这样的变性条带。
检测的方式是通过酶切检测,如果这条带在酶切后依然存在,则是变性条带,如果酶切后消失,则可能是质粒的不同状态。

我提取的质粒有明显的RNA污染,请问是什么原因?
可能有以下两种可能:
1、RNase A活力下降。Buffer S1在加入RNase A后要保存在4℃冰箱。如果室温放置,RNase A活力会下降,导致RNA污染。
2、菌体过量。如果使用的菌体量过多,也可能导致RNA污染。适当减少菌体的用量。

质粒得率很低,请问是什么原因?
质粒低的可能因素很多,以下是几种可能原因:
1、菌体过量,导致菌体不能完全裂解和中和,最终导致质粒得率低。
2、Buffer W2中未按瓶子上得标注体积加入乙醇。
3、菌体老化,影响提取的效果。建议对菌液进行划板培养,筛选新鲜克隆。

请问Eluent Buffer的配方是什么?对于DNA测序有没有影响?
Eluent Buffer 的配方是2.5mM Tris-HCl,pH8.0。质粒在这样的溶液中能够稳定保存,而且测序不受影响。

UE miRNA小量制备试剂盒 货号: UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250 规格: 50T/250T

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UE miRNA小量制备试剂盒

产品货号: UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250

产品规格: 50T/250T

目录价(元):1630.1/6844.5

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产品概述:

储存条件
Spin/vac mini column:小量制备管。室温密闭贮存。
Buffer R-I:细胞裂解液。室温密闭贮存。
Buffer R-II:中和液。室温密闭贮存。
Buffer TE (nuclease-free):洗脱液。10 mM Tris-Cl,0.1 mM EDTA, pH 7.5。室温密闭贮存。

UE miRNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250  规格:               50T/250T

流程图

UE miRNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250  规格:               50T/250T
说明书:

UE miRNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250  规格:               50T/250T UE-UE-MN-MiRNA-50/UE-MN-MiRNA-250    
常见问题解答:

miRNA提取得率低
·该组织或者细胞中miRNA含量偏低
不同细胞和组织中miRNA的丰度不同,对于miRNA含量低的样本,可适当提高起始样本用量。
·组织起始量太少或者太多
样品量过少,则细胞组织中miRNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致miRNA得率低。
·取样为上清液时,尽量吸尽上清(如细胞培养上清)。
·洗脱液温度过低
可以将洗脱液在65℃预热后使用。
·miRNA富集失败
检查离心力是否达到要求;确定加入100%异丙醇沉淀miRNA

OD260/OD280比值偏低
·蛋白质污染
在加入Buffer R-II中和离心后避免将沉淀物转移到制备管上。
·用水稀释样品
miRNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定,低离子强度或低pH值会使OD280值升高。
·多糖或多酚的残留
一些特殊的组织和植物中,多糖、多酚含量较多,这些残留也会导致OD260/OD280比值偏低。因此,从这类材料中提取miRNA时,需要注意多糖、多酚杂质的去除。

RNA降解
·材料保存不当
使用的组织材料不够新鲜。提取miRNA的组织材料应采用新鲜的组织材料,或将新鲜的组织材料用液氮迅速冷冻后置于-80℃保存。绝不能未经液氮速冻而直接保存于-80℃冰箱中。
·裂解液用量不足
如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解样品,一定要使裂解液完全浸膜样品。
·特殊材料
某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免miRNA的降解。更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。
·外源RNA酶的污染
试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统。
·内源RNA酶的污染
实验样品过多;匀浆时温度过高。

基因组DNA污染
·样品用量过多
样品用量超出了裂解液R-I的处理范围。请选择合适的样本处理量。
·样品中含有有机溶剂(如乙醇、DMSO等)
避免这些会引起裂解液性质改变的物质。
·加入Buffer R-II离心后,取上清时避免吸入沉淀。

下游RT-PCR失败
·乙醇残留
步骤9进行乙醇干燥不充分,有乙醇残留,从而抑制逆转录过程。

UE血RNA小量制备试剂盒 货号: UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250 规格: 50T/250T

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UE血RNA小量制备试剂盒

产品货号: UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250

产品规格: 50T/250T

目录价(元):1469.7/5876.3

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产品概述:

储存条件
Buffer RL: 红细胞裂解液。室温密闭贮存。
Buffer R-Ⅰ: 细胞裂解液。室温密闭贮存。
Buffer R-Ⅱ: 中和液。室温密闭贮存。
Buffer W1A concentrate: 洗涤液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用无水乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用无水乙醇或95%乙醇), 混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer TE(DNase & RNase-free): 洗脱液。10 mM Tris-HCL 0.1 mM EDTA, pH 7.5。室温密闭贮存。

UE血RNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250  规格:               50T/250T

流程图

UE血RNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250  规格:               50T/250T
说明书:

UE血RNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250  规格:               50T/250T UE-UE-MN-BL-RNA-50/UE-MN-BL-RNA-250    
常见问题解答:

红细胞没有完全裂解
·第2步中,冰浴后混浊的悬液没有变澄清
适当延长冰上孵育时间至20min。
·在第3步时,离心沉淀仍然是红色的
在第4步时加入Buffer RL后再增加冰上孵育时间5-10min。

RNA提取得率低
·组织用血量太少或者太多
起始血量过少,则RNA含量较低;起始血量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。
·取样为上清液时,尽量吸尽上清(如细胞培养上清)。
·洗脱液温度过低
可以将洗脱液在65℃预热后使用。

OD260/OD280比值偏低
·蛋白质污染
在加入Buffer R-II中和离心后避免将沉淀物转移到RNA结合膜上。
·用水稀释样品
RNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定,低离子强度或低pH值会使OD280值升高。
·确认Buffer W1A和Buffer W2加入的乙醇是否是100%无水乙醇/95%乙醇,加入体积是否正确。

RNA降解
·蛋白质污染
在加入Buffer R-II中和离心后避免将沉淀物转移到RNA结合膜上。
·用水稀释样品
RNA应使用TE Buffer稀释后再进行吸光度值的测定,低离子强度或低pH值会使OD280值升高。
·确认Buffer W1A和Buffer W2加入的乙醇是否是100%无水乙醇/95%乙醇,加入体积是否正确。

基因组DNA污染
·血样用量过多
血样用量超出了裂解液Buffer R-I的处理范围。请选择合适的样本处理量。
·样品中含有有机溶剂(如乙醇、DMSO等)。避免这些会引起裂解液性质改变的物质。
·加入Buffer R-II离心后,取上清时避免吸入沉淀

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号: UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250 规格: 50T/250T

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UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒

产品货号: UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250

产品规格: 50T/250T

目录价(元):685.2/3080.7

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产品概述:

储存条件
RNase A: 50 mg/ml, 室温贮存6个月;长期贮存于-20℃。
溶菌酶:50%甘油溶解溶菌酶,使溶菌酶浓度为50 mg/ml,-20密闭贮存。
Buffer S: 细菌原生质制备液,加入RNase A后,4密闭贮存。
0.25M EDTA: 室温密闭贮存。
Buffer G-A: 裂解液,室温密闭贮存。
Buffer G-B: 蛋白去除液,室温密闭贮存。
Buffer DV-A: Buffer DV的制备液(请参照实验准备Buffer DV的配制方法配制),室温密闭贮存。
Buffer DV: 相分离液,室温密闭贮存。
Buffer BV: DNA结合液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)并混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5,室温密闭贮存。

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250  规格:               50T/250T

流程图

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250  规格:               50T/250T

说明书:

UE细菌基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250  规格:               50T/250T UE-UE-MN-BT-GDNA-50/UE-MN-BT-GDNA-250    
常见问题解答:

洗脱产物的DNA量很少或没有
·样品量过多,使试剂处理能力不够。
·裂解不充分 
溶菌酶失活(-20℃可放6个月)
溶菌酶作用时间不够
·吸取下相时有上相的物质污染
·buffer W2中未加无水乙醇或者使用了低浓度的乙醇代替了无水乙醇。 
·DNA洗脱效率不高
最后一次buffer W2洗涤完后不要将制备管放于负压装置上抽的过干。

A260/280比值过低
·样品量过多
·细菌裂解不完全
·吸取下相时有中相层物质污染

RNA污染 (A260/280比值偏高)
·未将RNase A加入到buffer S中
·RNase A失活或者酶量不够

基因组DNA有降解
完全降解的基因组DNA在凝胶电泳上会出现模糊的条带或者是拖尾现象。
·菌液不新鲜,细胞凋亡导致DNA降解
·操作过于剧烈导致DNA被机械打断
·未能有效抑制内源核酸酶作用
溶菌酶裂解时间过长,没有及时加入EDTA并且低温操作。

基因组DNA酶反应效果不佳
·DNA纯度低
样品过多导致裂解不充分,从而引起大量蛋白、多糖、脂类等杂质残留,影响后续酶切反应效果。可适当减少样品初始量。
·盐分污染:可以用2× Buffer W2进行洗涤
·乙醇污染:在最后一次Buffer W2洗涤后可将制备管由原来离心1min 增加至离心2min

滤器或者制备管堵孔
·样品过多
·裂解不充分 

UE-96质粒DNA试剂盒 货号: UE-96-P-4/UE-96-P-24 规格: 4T/24T

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UE-96质粒DNA试剂盒

产品货号: UE-96-P-4/UE-96-P-24

产品规格: 4T/24T

目录价(元):2612/11383.2

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产品概述:

储存条件
RNase A:50 mg/ml,室温贮存6个月;长期贮存于-20℃。
Buffer S1: 细菌悬浮液,加入RNase A后混合均匀后,4贮存。
Buffer S2: 细菌裂解液(含SDS/NaOH), 室温密闭贮存。
Buffer S3: 中和液,室温密闭贮存。
Buffer W1: 洗涤液,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5,室温密闭贮存。
10 X Buffer W2 (24 X 96试剂盒):用于配制Buffer W2 。

UE-96质粒DNA试剂盒 货号:               UE-96-P-4/UE-96-P-24  规格:               4T/24T

流程图

UE-96质粒DNA试剂盒 货号:               UE-96-P-4/UE-96-P-24  规格:               4T/24T


说明书:

UE-96质粒DNA试剂盒 货号:               UE-96-P-4/UE-96-P-24  规格:               4T/24T UE-UE-96-P-4/UE-96-P-24    
常见问题解答:

同样体积的新鲜菌液,为什么有些提取的质粒浓度高,而有些质粒的浓度低?这些情况应该如何处理?
质粒提取高低的一个重要决定性因素是质粒载体的拷贝数,即质粒在一个大肠杆菌中的数目。对于低拷贝数的质粒,需要适当增加菌液的收集量,详情请参阅说明书。
以下是几种常见载体的拷贝数:
UE-96质粒DNA试剂盒 货号:               UE-96-P-4/UE-96-P-24  规格:               4T/24T

请问能否使用UE质粒小量制备试剂盒、UE-96质粒DNA试剂盒提取BAC之类的大质粒?
不建议使用。对于大质粒的提取,推荐您选择UE Easy-96质粒试剂盒。 

UE-96质粒DNA试剂盒、UE Easy-96质粒试剂盒与UE质粒小量制备试剂盒相比有哪些优势?选择这些试剂盒有哪些需要注意的?
96孔板质粒提取试剂盒适合于大规模操作,节省人力和试剂成本。使用这些试剂盒需要与之配套的96孔板离心机及相应的rotor,在操作中需要与96孔板配套的排枪。

我提取的质粒为什么会有基因组条带?
菌体在裂解和中和过程中如果操作过于剧烈就容易引起基因组污染。加入Buffer S2后要轻柔混匀,加入Buffer S3后混合均匀。如果发现裂解物在操作过程中过于黏稠,需要适当降低菌体的用量。

我提取的质粒在电泳图片上看,有一条紧挨着主带的小条带请问这是什么原因?如何判定它是否是杂带?
那条带很有可能就是变性条带。如果在加入Buffer S2后没有及时混匀菌体,会导致菌体局部碱性过强,破坏质粒的结构,在加入Buffer S3后质粒无法完全复性,就产生了这样的变性条带。
检测的方式是通过酶切检测,如果这条带在酶切后依然存在,则是变性条带,如果酶切后消失,则可能是质粒的不同状态。

我提取的质粒有明显的RNA污染,请问是什么原因?
可能有以下两种可能:
1、RNase A活力下降。Buffer S1在加入RNase A后要保存在4℃冰箱。如果室温放置,RNase A活力会下降,导致RNA污染。
2、菌体过量。如果使用的菌体量过多,也可能导致RNA污染。适当减少菌体的用量。

质粒得率很低,请问是什么原因?
质粒低的可能因素很多,以下是几种可能原因:
1、菌体过量,导致菌体不能完全裂解和中和,最终导致质粒得率低。
2、Buffer W2中未按瓶子上得标注体积加入乙醇。
3、菌体老化,影响提取的效果。建议对菌液进行划板培养,筛选新鲜克隆。

请问Eluent Buffer的配方是什么?对于DNA测序有没有影响?
Eluent Buffer 的配方是2.5mM Tris-HCl,pH8.0。质粒在这样的溶液中能够稳定保存,而且测序不受影响。

UE血基因组DNA小量制备试剂盒 货号: UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250 规格: 50T/250T

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UE血基因组DNA小量制备试剂盒

产品货号: UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250

产品规格: 50T/250T

目录价(元):733.8/3471.4

大包装询价


产品概述:

储存条件
Buffer AP1: 细胞裂解液,室温密闭贮存。
Buffer AP2: 蛋白沉淀液,室温密闭贮存。
Buffer W1 A concentrate: 洗涤液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer TE : 5 mM Tris-HCI,0.1 mM EDTA,pH 8.5。室温密闭贮存。

UE血基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250  规格:               50T/250T

流程图

UE血基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250  规格:               50T/250T

说明书:

UE血基因组DNA小量制备试剂盒 货号:               UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250  规格:               50T/250T UE-UE-MN-BL-GDNA-50/UE-MN-BL-GDNA-250    
常见问题解答:

洗脱产物的DNA量很少或没有
·血样品中白细胞含量过低
·Buffer AP1裂解不充分
·加入Buffer AP2后没有充分混匀
·DNA没有有效的被洗脱
·血液不新鲜或者出现凝固 

A260/280比值过低
·Buffer AP1裂解不充分
·与Buffer AP2没有充分混匀
·Buffer AP1与BufferAP2添加次序错误
·血液在室温中存放过长时间

基因组DNA有降解
根据降解的完整性,在琼脂糖凝胶电泳中基因组DNA要么呈现一条糊状条带要么是大分子量条带前的一个拖尾现象。在这个纯化过程中任何的物理作用都不会有效的造成视觉上可见的降解,引起这种情况的大多数可能来源于酶。酶引起的降解可能是血样品长时间或者不当的储存导致的或者未能有效抑制内源核酸酶作用。

基因组DNA酶反应效果不佳
·DNA浓度低
·盐分污染
可以用2× Buffer W2进行洗涤
·乙醇污染
在最后一次Buffer W2 洗涤后可将制备管由原来离心1min增加至离心 2min。

制备管堵孔
·血液样品中白细胞的含量过高
·Buffer AP1裂解不充分
·与Buffer AP2没有充分混匀
·放血后血液混匀不充分,导致凝血
·冷冻或者室温保存过长时间的血中会形成沉淀物

UE-96血基因组DNA试剂盒 货号: UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12 规格: 4T/12T

上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品

UE-96血基因组DNA试剂盒

产品货号: UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12

产品规格: 4T/12T

目录价(元):5960.8/11857

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产品概述:

储存条件
Proteinase K: 冻干的蛋白酶K可室温贮存6个月,长期贮存请置于4: 溶解后在2-8℃可贮存2个月,长时间保存请勿置千室温。
Buffer PK: 蛋白酶K溶解液,室温密闭贮存。
Buffer BL: 细胞裂解液,室温密闭贮存。
Buffer W1 B concentrate: 洗涤液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均匀,室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate: 去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇), 混合均匀,室温密闭贮存。可用100%乙醇或95%乙醇。
10X Buffer W2 (12X96试剂盒):用于配制Buffer W2。
Eluent B: 7.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 0.3 mM EDTA, 室温密闭贮存。

UE-96血基因组DNA试剂盒 货号:               UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12  规格:               4T/12T

流程图

UE-96血基因组DNA试剂盒 货号:               UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12  规格:               4T/12T
说明书:

UE-96血基因组DNA试剂盒 货号:               UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12  规格:               4T/12T UE-UE-96-BL-GDNA-4/UE-96-BL-GDNA-12    
常见问题解答:

制备板堵孔
·血液凝固
去除血块后重新实验
·冷冻或者室温保存过长时间的血中会形成沉淀物。
使用新鲜血
·白细胞含量过多或者加入了血沉棕黄层。
用PBS稀释样品。
·不充分混匀导致裂解不完全。
样品与Buffer BL混匀要快速充分。
·蛋白酶K活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K

洗涤后96孔制备板中含有有色的残留物(亚铁血红素)
·样品与Buffer BL不充分混匀导致细胞裂解效率降低。
·蛋白酶K活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K
·正确配置Buffer W1B和Buffer W2。
确保正确的乙醇用量用于稀释Buffer W1B和Buffer W2浓缩液。

得率低或者得不到DNA
·样品中白细胞的含量少
·在将裂解产物移入96孔制备板前没有加入乙醇。
准备新的样品再次进行纯化。
·样品与Buffer BL不充分混匀导致细胞裂解效率降低。
样品与Buffer BL混匀要快速充分
·温浴时间不足或者温度不够引起的细胞裂解不充分或者蛋白降解不足。
蛋白酶K活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K
·在洗脱前96孔制备板没有在室温中静置1min。
·DNA没有被有效洗脱。
为了提高洗脱效率,Eluent B或者去离子水在使用之前可以先在65℃温浴。

A260/280比值低
·样品与Buffer BL不充分混匀导致的细胞裂解效率降低。
·温浴时间不足或者温度不够引起的细胞裂解不充分或者蛋白降解不足蛋白酶K·活性降低导致裂解不完全。
使用新的蛋白酶K
·正确的乙醇量用于稀释Buffer W1B和Buffer W2浓缩液。

基因组DNA后续酶反应效果差
·样品中没有足够的DNA 
可以在得率低或者得不到DNA中查找可能的原因。
·纯化的DNA被抑制物污染。
可参照“A260/280比值低”
·DNA降解
可将样品跑分析凝胶电泳来检测其完整性
·过多的DNA应用于PCR中 
减少DNA模板量重新PCR
·洗脱液中有Buffer W2残留

UE-96DNA凝胶回收试剂盒 货号: UE-96-GX-4/UE-96-GX-24 规格: 4T/24T

上海金畔生物科技有限公司代理UELANDY荧光染料全系系列产品

UE-96DNA凝胶回收试剂盒

产品货号: UE-96-GX-4/UE-96-GX-24

产品规格: 4T/24T

目录价(元):2804.1/11713

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产品概述:

储存条件
96-well DNA plate-A:96孔DNA制备板。
Buffer DE-A:凝胶熔化剂,含DNA保护剂,防止DNA在高温下降解。室温密闭贮存。

Buffer DE-B:结合液(促使大于70bp的DNA片段选择性结合到DNA制备膜上)。温室密闭贮存。
Buffer W2 concentrate:去盐液。首次使用前,必须按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),充分混合后使用。每次使用后需将瓶盖盖紧,以保持W2中的乙醇含量。
Eluent: 洗脱液,室温密闭贮存。 

UE-96DNA凝胶回收试剂盒 货号:               UE-96-GX-4/UE-96-GX-24  规格:               4T/24T

流程图

UE-96DNA凝胶回收试剂盒 货号:               UE-96-GX-4/UE-96-GX-24  规格:               4T/24T


说明书:

UE-96DNA凝胶回收试剂盒 货号:               UE-96-GX-4/UE-96-GX-24  规格:               4T/24T UE-UE-96-GX-4/UE-96-GX-24    
常见问题解答:

回收率低
·目的片段结合量低
通常这是因为样品中琼脂糖过多或者质量不好或者溶解不充分所导致。
对于小于400bp的片段回收时未加异丙醇会降低片段的结合量,因此要务必确保已加入了1倍体积量的异丙醇(100%)。
电泳缓冲液PH值过高,影响目的片段的结合。
·结合的DNA片段过早的被洗脱
buffer W2 中未加无水乙醇或者加入的乙醇不是95-100%的,都将会导致DNA片段在后续的洗涤过程中过早的被洗脱下来。因此要务必确保加入了正确的乙醇量。每次使用后应拧紧瓶盖,以免乙醇挥发,降低回收率。
·洗脱效率低
最后一次buffer W2洗涤完后不要将制备管放于负压装置上抽的过干。为了提高洗脱效率可将洗脱液在65℃预热。若用去离子水洗脱,请确保其PH值在7.0-8.5之间。
选用合适浓度的琼脂糖凝胶电泳,上样量不超过制备管的最大结合量(8ug)。切胶要迅速,防止紫外线对DNA的损伤。

酶切反应不理想
·盐分残留
可以用2×Buffer W2进行洗涤
·乙醇残留
在最后一次Buffer W2洗涤后可将制备管由原来离心1min增加至离心2min。
·琼脂糖残留
为了确保完全去除琼脂糖,应确保琼脂糖块在Buffer DE-A中完全溶解。切胶时尽可能只保留含有DNA片段部分的凝胶以便于对琼脂糖的处理。
·琼脂糖凝胶电泳呈小弥散带
可能洗脱产物中含有ssDNA,需将洗脱产物95度加热2min,慢慢冷却至室温,使单链DNA重新退火即可。

膜脱落
·琼脂糖有残留,堵塞膜孔,导致膜在高速离心时受力过大,引起膜脱落或者膜下端突出,影响DNA回收

联合弯头(30系列)(简称:30-13UE C)日本三博特sanplatec

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产品名称:
联合弯头(30系列)(简称:30-13UE C)
产品编号 WEB14646
价格 会员价:0元;市场价:0元
产品特点
简称:30-13UE C
产品规格
.
材料

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联合弯头(30系列)(简称:30-13UE C)联合弯头(30系列)(简称:30-13UE C)产品特征

A

B

C

D

E

F

W

T(mm)

适用管外径(inch)

产品编号

简称

72

36

25

18

10

26

22

13

14646

30-13UE C

单位:mm

主体:PTFE

螺帽:ECTFE

W是对角线的尺寸。

 

特点

毫米、英寸规格的管均可通用。

最大使用压力请咨询。

  联合弯头(30系列)(简称:30-13UE C)

联合弯头(30系列)(简称:30-12.7UE C)日本三博特sanplatec

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产品名称:
联合弯头(30系列)(简称:30-12.7UE C)
产品编号 WEB14645
价格 会员价:0元;市场价:0元
产品特点
简称:30-12.7UE C
产品规格
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材料

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联合弯头(30系列)(简称:30-12.7UE C)联合弯头(30系列)(简称:30-12.7UE C)产品特征

A

B

C

D

E

F

W

T(mm)

适用管外径(inch)

产品编号

简称

72

36

25

18

10

26

22

1/2

14645

30-12.7UE C

单位:mm

主体:PTFE

螺帽:ECTFE

W是对角线的尺寸。

 

特点

毫米、英寸规格的管均可通用。

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  联合弯头(30系列)(简称:30-12.7UE C)

联合弯头(30系列)(简称:30-12UE C)日本三博特sanplatec

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产品名称:
联合弯头(30系列)(简称:30-12UE C)
产品编号 WEB14644
价格 会员价:0元;市场价:0元
产品特点
简称:30-12UE C
产品规格

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材料

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联合弯头(30系列)(简称:30-12UE C)联合弯头(30系列)(简称:30-12UE C)产品特征

A

B

C

D

E

F

W

T(mm)

适用管外径(inch)

产品编号

简称

72

36

25

18

10

26

22

12

14644

30-12UE C

单位:mm

主体:PTFE

螺帽:ECTFE

W是对角线的尺寸。

 

特点

毫米、英寸规格的管均可通用。

最大使用压力请咨询。

  联合弯头(30系列)(简称:30-12UE C)

联合弯头(30系列)(简称:30-10UE C)日本三博特sanplatec

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产品名称:
联合弯头(30系列)(简称:30-10UE C)
产品编号 WEB14643
价格 会员价:0元;市场价:0元
产品特点
简称:30-10UE C
产品规格
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材料

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联合弯头(30系列)(简称:30-10UE C)联合弯头(30系列)(简称:30-10UE C)产品特征

A

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W

T(mm)

适用管外径(inch)

产品编号

简称

60

30

21

16

8

22

17

10

3/8

14643

30-10UE C

单位:mm

主体:PTFE

螺帽:ECTFE

W是对角线的尺寸。

 

特点

毫米、英寸规格的管均可通用。

最大使用压力请咨询。

  联合弯头(30系列)(简称:30-10UE C)