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ProtoScript® cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6300L NEB酶试剂 New England Biolabs

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ProtoScript® cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6300L

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特性

 提供酶混合液与反应混合液，建立反应更加便捷
 适合各种需求的 PCR
 不同起始量的 RNA 都能高效反转录
 合成至少 5 kb 长度的 cDNA 

概述

 ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液，ProtoScript 酶混合液与 ProtoScript 反应混合液。ProtoScript 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂；ProtoScript 反应混合液含 dNTP 与经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。合成的第一链 cDNA 产物长度可超过 13.0 kb。该试剂盒曾用名为 M-MuLV cDNA 第一链合成试剂盒。

ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒组分

– 10X ProtoScript 酶混合液
– 2X ProtoScript 反应混合液
– 随机引物混合液（60 μM）、Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**、无核酸酶污染的水
** Oligo d(T)23VN 和随机引物混合液含有 1 mM dNTP
ProtoScript® cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6300L

ProtoScript® II cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6560L NEB酶试剂 New England Biolabs

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ProtoScript® II cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6560L

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150 次反应
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随机引物混合液

特性

 提供酶混合液与反应混合液，建立反应更加便捷
 适合各种需求的 PCR
 不同起始量的 RNA 都能高效反转录
 合成至少 10 kb 长度的 cDNA
 2 管装混合液方便使用 

概述

 ProtoScript II cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液，ProtoScript II 酶混合液与ProtoScript II 反应混合液。酶混合液含 ProtoScriptII 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂，反应混合液含dNTP 与经过优化的缓冲液。protoScript II 反转录酶是重组的 M-MuLV 反转录酶，降低了 RNase H 活性且提高了热稳定性。与野生型 M-MuLV 反转录酶相比，ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链 cDNA。该酶活性温度高达 50℃，且具有特异性高、cDNA 产量高的特点。
该试剂盒还提供两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 能与poly(A)尾的起始端退火；优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括mRNA 和无 polyA 尾的 RNA。第一链 cDNA 合成长度可达 10 kb。

ProtoScript II cDNA 第一链合成试剂盒组分

– 10X ProtoScript II 酶混合液
– 2X ProtoScript II 反应混合液
– 随机引物混合液（60 μM）、Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**、无核酸酶污染的水

**Oligo d(T)23 VN 和随机引物混合液包含 1 mM dNTP 

如需稳定扩增不同种类的 DNA 模板，推荐使用 OneTaq® DNA 聚合酶或 Q5® 超保真 DNA 聚合酶。

 


ProtoScript® II 反转录酶 货 号 #M0368L NEB酶试剂 New England Biolabs

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ProtoScript® II 反转录酶 货 号 #M0368L ProtoScript® II 反转录酶 货 号 #M0368L ProtoScript® II 反转录酶 货 号 #M0368L

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#M0368L
10,000 units
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849.00
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特性

 不同起始量的 RNA 均能高效反转录
 提高热稳定性
 合成至少 10 kb 长度的 cDNA 

概述

ProtoScript II 反转录酶是一种重组的 M-MuLV 反转录酶，其 RNase H 酶活性降低且热稳定性增加。与野生型 M-MuLV 反转录酶相比， ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链 cDNA。 ProtoScript II 活性温度高达 50℃，且具有特异性高、产量高和 合成 cDNA更长的特点，合成 cDNA长度可达 12 kb。本产品曾用名为 M-MuLV 反转录酶（RNase H–）。 

来源

来自重组 E. coli 菌株，携带有突变的 MMuLV反转录酶（RNase H–）编码基因，经高度纯化而获得。

反应条件

 1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl（pH 8.3 @ 25℃），75 mM KCl，3mM MgCl2]，10 mM DTT，200 units M-MuLV （RNaseH–），添加 0.5 mM dNTPs（不随酶提供）和 5 μMdT23VN（不随酶提供），42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。热失活：65℃ 20 分钟。

质保声明

 通过 RT-PCR 验证，以总 RNA 为模板可合成 9.2 kb 的 cDNA。

单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，以poly（rA）为模板，以 oligo（dT）18 为引物，37℃条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。

浓度

 200,000 units/ml。

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 ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒含有两种经过优化的混合液，ProtoScript 酶混合液与 ProtoScript 反应混合液。ProtoScript 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂；ProtoScript 反应混合液含 dNTP 与经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。合成的第一链 cDNA 产物长度可超过 13.0 kb。该试剂盒曾用名为 M-MuLV cDNA 第一链合成试剂盒。

ProtoScript cDNA 第一链合成试剂盒组份

– 10X ProtoScript 酶混合液
– 2X ProtoScript 反应混合液
– 随机引物混合液（60 μM）、Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**、无核酸酶污染的水

**Oligo d(T)23VN 和随机引物混合液含有 1 mM dNTP

ProtoScript® cDNA 第一链合成试剂盒 货 号 #E6300L

使用 ProtoScript 试剂盒合成第一链 cDNA 。反应温度为 42℃，模板为 2 μg 人脾总 RNA。阴性对照反应（-RT）使用 1X ProtoScript 反应混合液进行。以部分第一链 cDNA 产物为模板，使用 1X LongAmp® Taq 2X 预混液（NEB #M0287）扩增三种不同信使 RNA 的特异序列。泳道 1：β 肌动蛋白基因的 1.1 kb 片段；泳道 2：β 肌动蛋白基因 1.1 kb 片段的–RT对照；泳道 3：Xrn-1 基因的 4.7 kb 片段；泳道 4：Xrn-1 基因 4.7 kb 片段的–RT对照；泳道 5：鸟嘌呤核苷酸交换因子 p532 的 9.8 kb 片段；泳道 6：鸟嘌呤核苷酸交换因子 p532 9.8 kb 片段的 -RT 对照。Marker M 为 2-Log DNA Ladder（NEB #N3200）。

 

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该试剂盒还提供两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。Oligo-dT 引物 [d(T)23VN] 能与 polyA 尾的起始端退火；优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 和无 poly A 尾的 RNA。第一链 cDNA 合成长度可达 10 kb。 

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如需稳定扩增不同种类的 DNA 模板，推荐使用 OneTaq® DNA 聚合酶或 Q5® 超保真 DNA 聚合酶。

 


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来源

来自重组 E. coli 菌株，携带有突变的 MMuLV 反转录酶（RNase H–）编码基因，经高度纯化而获得。 

反应条件

1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃)，75 mM KCl，3 mM MgCl2]，10 mM DTT，200 units ProtoScript II ，0.5 mM dNTPs（不随酶提供）和 5 μM dT23VN（不随酶提供），42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。
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单位定义

1 单位指在 50 μl 反应体系中，以 poly(rA) 为模板，以 oligo(dT)18 为引物，37℃ 条件下，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.neb-china.com 或www.neb.com。 

浓度

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