上海金畔生物专业供应一系列的凝集素；同时提供各种荧光标记修饰偶联的凝集素。提供罗丹明、CY3、CY5、FITC、生物素Biotin、琼脂糖Agarose、DyLight 488、DyLight 594、DyLight 649、Texas Red标记各种凝集素。

双孢蘑菇凝集素(ABL)是由两个至四个非常相似的分离蛋白组成,每个四聚体约17 kD亚基。这种凝集素结合Thomsen-Friedenreich抗原,也称为T-二糖,半乳糖基(β-1,3)N-乙酰半乳糖胺。不同于花生凝集素,它不结合唾液酸化的T抗原,ABL结合唾液酸化或无唾液酸化的形式。ABL结合所有血型和IgA亚类的O-连接聚糖。简单的一糖和二糖只具有轻微的。

FITC标记凝集素的组织化学染色程序

1．组织切片经脱蜡处理，若是Bouin液固定的组织，用70％乙醇洗3次除去组织切片内的黄色后，再用蒸馏水漂洗；

2．PBS漂洗(含1％牛血清白蛋白)2次，每次5分钟；

3．加入FITC-凝集素(PBS适当*释)，置湿盒内孵育，室温1小时；

4．PBS漂洗3次，每次5分钟；

5．水溶性封片剂封片，荧光显微镜观察。

6．结果 FITC标记的凝集素能直接与组织细胞内的糖基结合，从而显示糖基的位置，可用于检测组织细胞中的糖成分，阳性部位呈黄绿色荧光。

7．注意事项

(1)固定液：以Bouin固定液为佳，也可用70％乙醇固定；

(2)与其他组织化学方法一样，染色过程中，应始终保持一定湿度，使切片保持湿润状态；

(3)需经预实验确定FITC-凝集素的*佳工作浓度；

(4)凝集素的活性部位需重金属离子维持，故可用TBS作为缓冲液，加微量的金属(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1．0mmol/L)，可增强凝集素的结合能力。

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双孢蘑菇凝集素(ABL)是由两个至四个非常相似的分离蛋白组成,每个四聚体约17 kD亚基。这种凝集素结合Thomsen-Friedenreich抗原,也称为T-二糖,半乳糖基(β-1,3)N-乙酰半乳糖胺。不同于花生凝集素,它不结合唾液酸化的T抗原,ABL结合唾液酸化或无唾液酸化的形式。ABL结合所有血型和IgA亚类的O-连接聚糖。简单的一糖和二糖只具有轻微的。

琼脂糖结合的双孢蘑菇凝集素是用我们的亲和纯化凝集素制备的。以分子量排除极限约为2×107道尔顿的热稳定交联4%琼脂糖微球作为固相基质,凝集素与之共价偶联。小心地控制凝集素在珠子上的附着,以保持凝集素活性,并使结合凝集素的构象变化*小化,这可能导致非特异性的离子或疏水相互作用。我们开发的技术将凝集素偶联到琼脂糖珠上,在凝集素和基质之间插入亲水性间隔臂。

注意事项

(1)固定液：以Bouin固定液为佳，也可用70％乙醇固定；

(2)与其他组织化学方法一样，染色过程中，应始终保持一定湿度，使切片保持湿润状态；

(3)需经预实验确定FITC-凝集素的*佳工作浓度；

(4)凝集素的活性部位需重金属离子维持，故可用TBS作为缓冲液，加微量的金属(CaCl2、MgCl2、MnCl2各1．0mmol/L)，可增强凝集素的结合能力。

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