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EZBioscience逆转录试剂盒,预混型
一、试剂盒简介
EZBioscience逆转录试剂盒,预混型为包含去除基因组DNA的高效DNase的新一代快速逆转录试剂盒,与上一代产品相比具有更高的逆转录效率。试剂盒中主要包含3管成分:gDNARemover中主要包括浓缩的 DNase及Buffer;4xEZscriptRT Mix中主要包含了逆转录所需的所有成分(逆转录酶 buffer、RNase Inhibitor、dNTPs、Oligo dT18Random Hexamer等)。
EZBioscience逆转录试剂盒,预混型采用的DNase及Buffer反应系统经过特殊的优化,仅需室温(25℃)反应5分钟,就能降解95%以上的基因组DNA,极大的降低了可能残留的基因组对结果的干扰。
EZBioscience 逆转录试剂盒,预混型采用的新型M-MLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力,扩增效率尤佳,同时采用了新优化的反应体系,进一步提高了逆转录效率。使用本试剂盒逆转录15分钟得到的扩增产物量可以达到AMV逆转录酶大约1h的产物量(ct值相同)。后续逆转录产物建议用干PCR,aPCR,不建议用于基因克隆。
二、产品列表
*1:包括DNase和Buffer;
*2:包括逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP MixtureOligo(dT)1PrimerRandom Hexamer Primer等组分。
三、保存条件
本试剂盒建议置于-20℃保存。
四、 EZBioscience 逆转录试剂盒,预混型特点
1、本试剂盒为预先混好的4xEZscript RTMixII,只需加入模板RNA和水混匀后便可以开始反应;使用了新一代逆转录酶,具有更强的酶活性和更高的灵敏度。
2、含有去除基因组DNA的gDNARemover,只需室温5分钟即可去除基因组DNA。
3、只需42°℃,15分钟即可高效合成荧光定量PCR所需的高质量cDNA模板。
4、反转录引物使用了Oligo(dT)18和Random Hexamer这两种引物的混合物,极大提高了反转录的效率。
5、反转录反应可选择多种仪器如水浴锅、金属浴,不局限于PCR仪。
五、注意事项
1、当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2、gDNA Remover和4x EZscript RT Mix II在使用前需上下颠倒混匀,短暂离心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。
3、分装试剂时务必使用新的枪头(Tip),以防止样品间污染。