细胞因子检测的常见免疫学技术有哪些?

细胞因子检测的常见免疫学技术有哪些?

  细胞因子,是一类由免疫细胞和某些非免疫细胞(内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等)在受到刺激后合成和分泌的小分子蛋白质,具有广泛的生物学活性,通过结合相应受体,调控细胞生长、分化、凋亡、伤口愈合、信号转导和稳态平衡。研究细胞因子为临床上疾病的预防、诊断、机理研究以及治疗奠定了坚实基础,其应用前景广泛。那么你知道细胞因子检测的常见免疫学技术有什么吗?让我们一起来看看吧!
  一、传统Western Blot
  传统蛋白质免疫印迹法(Western Blot,WB)是一种常见的蛋白质免疫分析技术,被应用于确认特定蛋白质的存在并进行定性和半定量分析。WB实验基于抗原抗体特异性反应,经过SDS-PAGE分离蛋白质后,将其转移到硝酸纤维素薄膜(NC)或聚偏二氟乙烯膜(PVDF)。随后,使用脱脂牛奶封闭液进行封闭,一抗稀释液进行孵育。蛋白质与抗体结合后,通过洗涤去除未结合的一抗,接着加入酶标记或者荧光标记的二抗。最后,利用化学发光液或者特定的激发光源,对靶蛋白进行检测,可以通过胶片、化学发光仪或荧光成像仪进行成像,最终捕捉到蛋白条带。
  二、全自动毛细管Digital Western
  作为创新性毛细管电泳免疫学技术,全自动毛细管Digital Western(也称Simple Western)将Western Blot技术和ELISA技术合二为一,具备传统WB蛋白质可视化定性优势,同时具备ELISA免疫学实验精准定量能力,其灵敏度和精密度符合高标准生物分析要求,可利用超微量样本实现内源性蛋白质精准定量。自动化规避了传统WB和SDS-PAGE劳动密集型操作引入的人为误差。仅需要微量样本(3μL)即可实现多重蛋白质表达检测,节约珍贵样品,
  三、传统ELISA
  酶联免疫吸附测定法是一种常用的免疫测定方法,通常用于定量检测样本中目的蛋白的水平。利用ELISA检测的样本包括血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解物、唾液、组织裂解物和尿液。ELISA通常在96孔板中进行,孔板中包被有一种捕获特定分析物的抗体。在与实验样本、标准品或对照品孵育后,目标分析物将被这种抗体捕获。随后使用结合到目标分析物不同抗原表位的检测抗体完成”夹心”结构。接着加入底物溶液,产生的信号与结合的分析物量成比例。ELISA有不同形式,包括直接法ELISA、间接法ELISA、夹心法ELISA和竞争法ELISA。
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Cell Guidance Systems的使命是开发产品和服务,以改善人类状况并保护我们共同的环境。我们开发的技术能够递送生物活性分子,控制医学、研究和生物制造应用的细胞命运。以英国剑桥为基地,开发治疗产品以及医学研究工具和技术,以扩大生命科学和医学的可能性。成立于 2010 年,通过与研究人员密切合作,开发真正的创新产品,解决未满足的医疗和研究需求,取得了越来越大的成功。

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