金畔生物提供外泌体(Exosome)电镜DLS/NTA粒径分析表征电镜测定服务
键词:外泌体(Exosome),TEM透射电镜,DLS/NTA 粒径分析,电镜DLS NTA,表征电镜测定
外泌体表征电镜测定技术简介:
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm),指直径在40-100nm的盘状囊泡。密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、双层膜结构,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物液中。主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中,包括几乎所有类型的细胞(免疫细胞、神经细胞、干细胞),都可以产生并释放exosome。目前外泌体提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。
实验流程
步骤一:外泌体戊二醛固定。
步骤二:清洗–用1mL PBS清洗3次,每次静置15min。
步骤三:e酸固定–加入0.5 mL 2%e酸溶液 4度固定2h。
步骤四:清洗–用1mL PBS清洗3次,每次静置15 min。
步骤五: 脱水–用50%、70%、80%、90%乙醇各1mL梯度脱水分别静置15min,再用1mL 100%乙醇脱水2次,每次20min。
步骤六:置换–用1mL丙酮置换2次,每次静置15min。
步骤七:浸渍。
步骤八:包埋–将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中。
步骤九:聚合–将包埋板置于65℃条件下聚合48h。
步骤十: 染色–醋酸双氧铀染色 10min后清洗;醋酸铅染色 10min后清洗。
步骤十一:上机检测。
步骤十二:提供实验报告。
外泌体表征电镜测定图谱展示:
服务说明及结果
客户提供:客户提供外泌体样本或由我司分离得到需要检测的外泌体。
公司提供:基本实验步骤、图片、数据分析结果。
实验检测周期:5-10个工作日。