标签归档：沉默

常用的基因沉默技术有哪些？

发表于由

常用的基因沉默技术有哪些？

基因沉默主要指基因表达的抑制和沉默现象。在生物体内，基因的表达受到严格调控，而基因沉默就是一种重要的基因表达调控方式。根据作用方式的不同，基因沉默可分为自然发生的基因沉默和人为操作的基因沉默。自然发生的基因沉默可通过多种因素实现，如DNA甲基化、异染色质形成、转录后基因沉默（RNAi）等。而人为操作的基因沉默则可以通过基因敲除、转录因子抑制、表观遗传修饰等方法实现。那么，常用的基因沉默技术有哪些？一起来学习一下吧！

RNA干扰（RNAi）：RNAi技术利用双链RNA（dsRNA）引发特异性mRNA的降解，从而降低或关闭目标基因的表达。RNAi技术具有高效、特异性强、操作简单等优点，已成为研究基因功能和药物筛选的重要工具。然而，该技术也存在一定的脱靶效应和细胞毒性等问题。
化学沉默：化学沉默是指通过特定的化学抑制剂或药物作用于细胞，干扰基因的表达或转录过程，从而实现基因沉默。常用的化学沉默药物包括DNA甲基化抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂等。这类方法的优点是可以通过口服或注射给药，直接作用于患者体液或组织，但对于作用机制和药物剂量要求较高。
基因敲除：基因敲除技术通过同源重组或CRISPR-Cas9等手段，将目标基因进行部分或wan全敲除。该技术具有较高的特异性和可操作性，但需要设计特异性的核酸酶，且存在一定的细胞毒性风险。
以上就是有关于常用的基因沉默技术有哪些的问题解答，如果你想了解更多请咨询上海金畔客服哦！

RNA干扰（基因沉默）

发表于由

RNA干扰（基因沉默）

项目内容概述
RNA干扰(RNAi，RNA Interference)是抵御外来病毒侵犯的一种防御机制，广泛应用于功能基因组学、基因治疗、靶药物筛选、细胞信号通路分析、蛋白质互作等领域。具体来说，当dsRNA或pre-miRNA进入细胞后，能够被特异的核酸内切酶（Dicer）识别并切割成为很小的片段，这些片段在解旋酶的作用下会解链。反义链在与体内一些酶结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-Induced Silencing Complex，RISC），RISC与mRNA同源区进行特异性结合，若miRNA与mRNA的结合位点能够*配对，则会切割mRNA；若miRNA与mRNA的结合位点不能够*配对，则会抑制mRNA的翻译过程。
目前实验中主要采用miRNA、 shRNA 和siRNA 3种RNA干扰方法。shRNA是利用人源或鼠源的RNA聚合酶III（pol III）启动子，对编码短干扰RNA（siRNA）的DNA序列进行转录来实现RNA干扰。转录后的shRNA经加工，参与RISC的形成。与人工合成的siRNA相比，shRNA可以在较长时间内有效抑制细胞内靶基因的表达。miRNA是一类可以通过RNAi机制调节基因表达的内源性小RNA，人工miRNA与shRNA的设计原理基本相同，由于miRNA具有内源性，因此其更易产生有效的基因沉默。
我们拥有一系列shRNA/miRNA表达载体以及Sponge载体，同时提供包括shRNA/miRNA设计、慢病毒包装、阳性克隆鉴定、单克隆培养、基因沉默细胞系构建等一系列实验服务内容。

 
实验流程
1、细胞预实验。
2、慢病毒载体构建。
3、shRNA/miRNA功能验证。
4、慢病毒包装。
5、RNAi细胞系构建。
6、沉默效果检测。

  
我们的优势
1、提供各种实验材料和仪器，满足项目课题实验需要。
2、专业的操作人员。
3、高规格实验室。
4、数据结果交付周期快。
5、完善的服务体系，全程跟进，确保满意。
服务流程
1、提交项目课题相关需求和资料。
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致，签订技术服务合同。
5、开展实验，按期完成合同规定的内容。
6、结题，提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。
咨询与订购 
感谢您选择我们的服务，如果您有任何问题，请联系我们，我们将竭诚为您解答和服务。