Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒怎么用?
Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测。那么你知道Elabscience MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒该怎么用吗?让我们一起来看看吧!
1. 准备工作
本试剂盒中 MTT (5×)为浓缩液,实验前稀释成 1×工作液。例如:取 100 μL MTT (5×),加入 400 μL
MTT Diluent Buffer,混匀后即为1×MTT 工作液。
2. 取生长状态良好的细胞,调整细胞密度,按每孔100 μL 细胞悬液接种于96 孔板中,同时设空白孔(不加细胞但是加入同体积的培养基)。
注:通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。
3. 根据实验设计对细胞进行培养和处理。
4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液。继续孵育 1~4 h,使 MTT 还原为甲臜。
注:MTT孵育条件与细胞培养条件相同。
5. 小心吸出上清液,每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
6. 用酶标仪测定在 570 nm 处的吸光度。
7. 结果计算
[注]:
ODsample: 实验孔的OD值
ODcontrol: 对照孔的OD值
ODblank: 空白孔的OD值
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