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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学
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NEB PCR 克隆试剂盒
NEB PCR 克隆试剂盒(不含感受态细胞)
KLD 酶混合液
特性
适用于各种模板,稳定、高效的引入突变,进行指数扩增
Q5 超保真 DNA 聚合酶保真性极高,缩短筛选时间
可室温建立反应
使用常规引物,无需对寡核苷酸进行磷酸化或纯化
方便使用的预混液剂型
概述
Q5 定点突变试剂盒可以在 2 小时内快速对双链质粒 DNA 进行定点突变,该试剂盒使用稳定的 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶,结合客户自行设计的引物,在各种质粒中引入替换、缺失和插入突变。为保证效率,将产物转入试剂盒提供的高效级 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞,质粒长度可达 14.3 kb。
应用
• 在质粒 DNA 上产生替换、插入、缺失突变
图 1:Q5 定点突变试剂盒流程。该试剂盒可以快速、高效地对双链质粒 DNA 进行替换、缺失或插入突变。第一步是使用 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶进行指数扩增。第二步是包含激酶、连接酶和 DpnI 的特殊混合液处理,快速环化 PCR 产物和去除模板。第三步是高效转入化学感受态细胞。
Q5 定点突变试剂盒包含
– Q5 热启动超保真 Master Mix(2X)
– KLD 酶混合液(10X)和反应缓冲液(2X)
– 对照引物混合液(各 10 μM)和 DNA 模板(5 ng/μl)
– NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞(高效级)
– pUC19 转化对照质粒(5 pg/μl)
– SOC Outgrowth 培养基
质保声明
Q5 定点突变试剂盒经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。