如何选择合适的DNA提取试剂盒?

如何选择合适的DNA提取试剂盒?

实验室工作中,经常会需要用到纯化的DNA,这时我们通常需要使用一个商业的DNA提取试剂盒对目的DNA进行分离纯化。那么我们该如何选择合适的DNA提取试剂盒呢?让我们一起来看看吧!

一、试剂盒组分

目前大多数DNA提取试剂盒遵循相同的基本步骤: 裂解,柱纯化,洗涤杂质,柱洗脱。然而,不同的盒子在完成每个步骤的方式上有很大的不同。

二、使用的样本类型

不同的DNA来源有不同的试剂盒,从实验室培养的细胞,到临床样本,土壤样本,甚至指纹,也有许多专门用于某些应用的试剂盒。

例如,土壤中的腐殖酸或血液中的血红蛋白会污染纯化的DNA,从而干扰下游的DNA实验(如PCR)。当然,也有一些试剂盒会在进行纯化步骤之前专门去除这些组分。

如果想从PCR或琼脂糖凝胶中纯化DNA,有许多方法可以提高琼脂糖凝胶纯化的回收率。

三、基因组与质粒DNA提取

一般来说,质粒DNA分离要比基因组DNA分离温和。这是因为针对质粒DNA的裂解步骤需要染色体DNA与细胞蛋白片段保持结合,以防止其污染最终的样品。

两种类型的DNA回收都有试剂盒,甚至有可以同时纯化基因组DNA和总RNA的试剂盒。

四、细胞系与生物体

在选择DNA提取试剂盒时,最重要的变量可能是你所使用的生物体。

1. 细菌:

许多试剂盒都有用于细菌DNA分离的不同成分,这些试剂盒之间的主要区别在于细胞是如何被分解的,因为有些细菌比其他细菌更更有挑战性。

例如,形成生物膜的细菌可能比传统的基于去垢剂的方法需要更强的裂解技术。

2. 动物组织:

用于动物组织DNA分离的试剂盒通常具有更温和的裂解技术,因为大多数动物细胞不像细菌细胞那样有细胞壁。

然而,动物组织DNA提取的挑战往往在于选择合适的组织匀浆方法。此外,许多动物DNA纯化试剂盒不使用苯酚/氯仿萃取或乙醇作为沉淀步骤,以减少破坏DNA的风险。

3. 植物:

当涉及到植物DNA分离时,必须考虑到其他一些因素,需要注意污染物的去除。

植物在纯化过程中通常含有未分离的糖,因此,洗涤剂选择性地与DNA结合并从溶液中析出,通常是先将洗涤剂溶解在高浓度的盐溶液中,然后提取DNA。

4. 血液:

由于技术上的许多最新进展,血液DNA分离试剂盒中有多种裂解技术和提取方法可供选择。从血液中分离出的DNA将在很大程度上决定你使用的裂解和提取的类型。

更多有关DNA提取试剂盒的选择问题,请联系上海金畔生物科技有限公司:

 

胎牛血清采取什么样的制备方法合适?

胎牛血清采取什么样的制备方法合适?

胎牛血清是指从胎牛体内采集的血液,并在一定条件下经过处理和加工,得到的一种具有特殊功能和应用价值的生物制品。胎牛血清采取什么样的制备方法合适?让我们一起来看看吧!

来源:

胎牛血清的来源主要是通过人工饲养的母牛妊娠9-11个月产下的胎牛。这些胎牛在出生后,血液样品可以通过负压采集技术从脐静脉中采集得到。这一过程通常在出生后的24-48小时内进行,以确保血液中含有足够的血清成分。

制备方法:

一、采集血液样品:

使用负压采集技术从胎牛的脐静脉中采集血液样品。确保在出生后的24-48小时内进行采集,并采集足够数量的血液以满足后续制备的需要。

二、分离血液成分:

血液采集后,将其置于无菌容器中放置,使其在室温下凝结并分层。血液最上层的黄色液体是血清,并用无菌采样器将其分离。

三、过滤和灭活:

通过0.22微米的滤器将血清过滤,以去除细菌、病毒和其他微生物。然后使用低热处理或辐照等方法进行灭活,以确保制得的血清是无菌的。

四、浓缩与填充:

为了得到更高浓度的胎牛血清,将过滤后的血清进行浓缩处理。常用的浓缩方法有冷冻干燥和逆渗透浓缩等。浓缩后的血清经过灭菌处理后,以一定的体积填装到无菌的容器中。

五、质量控制:

对制备好的胎牛血清进行质量控制,包括检测致病菌和检验其纯度、稳定性等多项指标。

 胎牛血清的制备要求严格,在制备过程中需要严格控制温度、无菌条件和操作工艺,以确保产品的质量和安全性。制得的胎牛血清广泛应用于生物医药研究、细胞培养、疫苗制备、生物工程等领域,具有重要的应用价值。更多有关胎牛血清的来源与制备问题请联系胎牛血清代理——上海金畔生物科技有限公司