如何提高DNA纯度测定的准确性？

分子生物学实验中经常需要对样本进行浓度和纯度的测定，它相当于一种质控，以此来确保下游实验的结果可靠。那么该如何提高DNA纯度测定的准确性呢？让我们一起来看看吧！

常用的DNA浓度/纯度测定设备是紫外分光光度计，它的原理是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析物质成分。假设现在有一样物质A，它溶解在溶液内，当光照射溶液时，溶液内的A会吸收一部分的光。不同颜色的光有不同的波长，A对不同颜色的光（不同波长）的吸收程度是不一样的。

双链的DNA，它能对波长为260nm的光进行强烈的吸收，吸收的程度可以用一个叫吸光度的数值来测量，浓度越高的DNA，理论上吸光度也越高。

最后，通过与标准品的吸光度数值对比后，就可以知道未知浓度的DNA有多少量了。

DNA浓度测定通常会使用紫外分光光度计，常见的有NanoDrop这类设备。除了DNA，它还能测定RNA和蛋白的吸光度。

要提高浓度测定的准确性，需要注意以下几点：

1. 检测之前，务必充分混匀DNA溶液，因为这类机器的上样检测体积只需要1-2uL，如果样品没有混匀，那么每次检测样品浓度也会不一样。

2. 因为上样体积很小，所以样品很容易挥发，如果把样品加在检测基座后不马上检测的话，会导致测出来的样品浓度偏高。

3. 实验环境和耗材的稳定性要高。检测设备应该在放置在温度可控、通风的环境下；装样品的管子如果不是要进行吸取样品操作的话，需要时刻紧闭。

4. 每次检测完毕，都需要对检测基座或者比色皿进行清洗和擦拭，确保不会有样品残留后，再进行下一次上样检测。

5. 空白调零，应该使用溶解待检测样品的溶液来调零。例如如果用水溶解DNA，那就用水调零，用其他缓冲液溶解，则用对应的缓冲液调零。

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