关于胎牛血清，你知道多少？

一、什么是胎牛血清？

胎牛血清 (FBS) 是来自胎牛的凝结血液的液体部分，不含细胞、纤维蛋白和凝血因子，但含有大量对细胞生长至关重要的营养和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS 的主要成分。FBS 中的生长因子对于培养细胞的维持和生长至关重要。FBS 还含有多种小分子，如氨基酸、糖、脂质和激素。

FBS 应用广泛。FBS 的主要用途之一是在真核细胞培养中，其浓度高达 20% 甚至更高，它提供许多促进细胞存活和增殖的必需营养素和生长因子。然而，需要注意的是，人类细胞培养物中的 FBS 可能会引入研究成果。用人类血清培养的人类细胞与用 FBS 培养的细胞表现不同。FBS 还用于人类和兽用疫苗以及生物技术药物的研究、制造和控制，并用于阻止胰蛋白酶消化 或用作冷冻保存中的保护剂。

二、胎牛血清可以用在哪里？

胎牛血清（FBS）用作真核细胞体外细胞培养的生长补充剂 。动物血清（牛血清和其它动物血清）都用于细胞培养，其中使用最guang泛的是胎牛血清（FBS）。FBS含有生长因子和极低水平的抗体，因此在许多不同的细胞培养应用中具有多功能性。在FBS中发现了1000多种成分，包括蛋白质，电解质，脂质，碳水化合物，激素，酶和其他不确定的成分，这些成分在许多培养条件下对于支持细胞生长都是必需的。

制造环境中的学术和工业研究人员以及科学家都在其细胞培养基中使用胎牛血清（FBS）进行调查，包括生物技术研究/生产，疫苗制造，克隆和动物诊断。胎牛血清能够用在人兽疫苗及生物技术药物的科研、工业生产和质量控制领域。胎牛血清通常用于人源细胞系和原代细胞培养。

三、胎牛血清的优点是什么？

与其它类型血清相比，胚胎期动物血清含有更多的生长因子，及较少的gamma球蛋白含量。此外，跟新生动物血清和成体动物血清相比，胚胎期血清含有更低浓度的补体。补体具有溶解细胞的副作用，还会干扰免疫检测。

四、胎牛血清的来源地是哪里？

胎牛血清的主要来源地就是那些大量养牛的国家，包括美国、澳大利亚、新西兰、加拿大及南美和中美洲地区，由政府机构管理血清制品的生产及收集过程。胎牛血清分为美国农业部（USDA）级和欧盟级。其中，美国农业部级胎牛血清没有疯牛病（BSE）及口蹄疫（FMD）污染，能够出口到任何国家，而欧盟级胎牛血清只在大部分欧洲国家及亚洲国家销售。

五、如何保存胎牛血清？

胎牛血清一般是在-5°到-20°之间冻存，2°到8°之间融化。一个比较好的办法是，将胎牛血清分装到50ml管中，这样做就避免了反复冻融对血清造成的危害。偶尔一些试管等分的血清在冷冻温度下保持液态。这是由于缺少成核中心，就是一些引发结晶（冷冻）的颗粒物质。只需用手指轻弹管子，它们就会立即固化。血清融化后常出现沉淀，可能是血清蛋白变性造成的。简短离心即可除去沉淀，并且，这些沉淀一般不会影响血清质量的。

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关于血清的这些知识，你了解吗？

• 什么是血清

血清，指血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。

• 血清在细胞培养中的作用

血清的成分多样，可以给细胞提供：

1. 基本营养物质，如氨基酸、维生素、脂类物质、无机物、核酸衍生物等细胞生长必需的物质；

2. 激素：胰岛素、促生长激素、类固醇激素如睾酮和孕酮、肾上腺皮质激素如地塞米松等。

3. 生长因子：表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、血小板生长因子、神经细胞生长因子等；

4. 结合蛋白：结合蛋白在细胞代谢过程中起着重要作用，它能携带重要地低分子量物质，如转铁蛋白结合铁离子，白蛋白携带维生素、激素等；

5. 促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤；

6. 蛋白酶抑制剂：中和某些细胞(如内皮细胞等)释放的蛋白酶，从而对培养中的细胞起到某些保护作用；

7.血清含有的一些微量元素和离子在代谢解毒中起重要作用，如SeO₃，硒等；

8.血清蛋白使血清具有一定的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，如悬浮培养搅拌时保护细胞。

• 常用的血清

目前常用的血清有胎牛血清、新生牛血清和小牛血清。

以上三种血清中胎牛血清的品质ZUI高，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少，因此价格也最高。

• 血清的使用与选择

血清的使用浓度一般在5%~20%，常用是10%。

有些细胞需要胎牛血清才能生长，而有些细胞有小牛血清就能生长。因此，要根据具体用途与需要选择合适的血清。

• 血清的储存与解冻

1.储存：建议将血清储存在-5℃~-20℃（HyClone胎牛血清建议储存在-10℃）。注意：建议不要将血清储存在-80℃中！（因为储存在–80℃，解冻时巨大的温差会使血清产生更多的沉淀。）

2.解冻：不建议于4℃过夜解冻，也不建议直接将冷冻的血清放在37℃水浴或者温箱中解冻，因为若血清没有混匀，底部的蛋白会变性形成沉淀。

血清解冻的方法（三步法）如下：

注：在水浴过程中，血清要*浸入水中，同时在融化过程中要慢慢摇动瓶身混匀血清，但在摇动中尽量不要产生泡沫。

血清在解冻后，可以根据实验需求分装成单次用量，密封好后立即放回-20℃冰箱继续储存以供进一步使用，这样可以有效避免反复冻融的问题。

• 血清出现沉淀或絮状物质的原因

1. 2-8℃长时间储存。

2. 解冻过程中未混匀。

3. γ–辐照：不会损害血清的理化特性或细胞培养性能。

4. 反复冻融：使血清脂蛋白发生变性造成浑浊。

5. 血清中残留的纤维蛋白原：残留的纤维蛋白原在解冻后会转化为纤维蛋白，过量的纤维蛋白在血清中表现为可见的絮状物质。

去除方法：400 g离心。不建议直接过滤血清以去除絮状物质，因为过滤器可能会堵塞或者截留重要的蛋白质。

6. 磷酸钙：磷酸钙在血清中通常呈云状，并且在倒置显微镜下观察会看到可以自由移动的小黑点，因此磷酸钙沉淀通常被误认为是微生物污染物。

检测是否污染方法：将1 mL待测血清直接倒在细菌琼脂平板上，在37℃培养之后观察菌落的生长情况。在油镜（放大1000倍）下观察革兰氏染色，以确定是否受到污染。不建议用37℃孵育的血清直接检测无菌性，因为在37℃孵育之后，血清中的磷酸钙沉淀物会增加。

• 国内购买胎牛血清的现状

难辨真假，产地不实，有的甚至都不是牛血清。非正规胎牛血清产品会直接影响实验的结果和稳定以及数据的真实性，对实验造成很大的影响。因此，购买血清产品时一定要选择可靠的产品！

上海金畔生物科技有限公司提供来源可靠，产地可查的HyClone、Omnimabs以及澳申生物的血清产品。

• HyClone新西兰源胎牛血清产品优势：

1.「真混合」生产工艺，确保批内一致性；

2.采用一次性生产设施，*消除了交叉污染的风险；

3.最DA的批处理能力，降低批间差异造成的影响；

4.完整的来源地可追溯性；

5.低抗体含量，高生长因子；

6. Oritain^TM天然品指纹识别技术；

• Omnimabs南美胎牛血清产品优势：

1. 合法进口于无疯牛病疫区，具有合法的进口批文、海关证明以及检验检疫证明；

2. 百分之BAI原装血源；

3.采血点集中，生产工艺*，批次稳定；

4.符合GMP车间要求，满足工业客户的需要。

• 澳申生物新生牛血清产品优势：

1.国家批准的血源地，血清均可追溯源头，一瓶一码；

2.国际先JIN生产工艺：3级0.1 μm过滤，标准净化车间，万级环境下罐装，全程低温控制系统；

3.国内双重质检，全面理化、微生物检测，不含BVDPI3IBRRABVBAV BRSVBTV等牛病病毒。

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