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T7体外快速转录试剂盒

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上海金畔生物科技有限公司提供T7体外快速转录试剂盒 ，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
T7体外快速转录试剂盒

详情介绍

产品简介：T7体外快速转录试剂盒的特殊配方使用户能够在30分钟内通过体外转录反应获得尽可能多的RNA产量。标准的20微升反应将从1微克对照模板中产生高达180微克的RNA。这些产量是由T7转录酶的高性能特性实现的。

T7体外快速转录试剂盒可产生*的长或短转录产量。标准反应可按比例放大，以产生毫克量的RNAT7 转录VT RNA可通过使用CELLSCRIPT的脚本加工成MRNA（5端封端和3端聚（A）尾）Cap T MG Capping System、Scriptcap 2-o-甲基转移酶试剂盒和A plus Poly（A）聚合酶拖尾试剂盒（单独提供）。CELLSCRIPT还提供用于生产假尿苷和5-甲基胞嘧啶（GA C和GA5MC）VT RNA的转录试剂盒。研究表明，+-MRNAS和Y5Mc MRNAS在较高水平上转化为蛋白质，并诱导较低的先天免疫反应。与相应的修饰MRNAS相比，表达各种RNA传感器的细胞。

产品名称：T7快速体外转录试剂盒

英文名称：T7-FlashScribe™ Transcription Kit

产品编号：C-ASF3507

产品规格：50次/盒

产品应用：用于使用 T7 RNA 聚合酶和经典 (GAUC) NTP 生产体外转录的 RNA。

试剂盒材料：

上海金畔生物代理MOLTOX在中国的业务。

上海金畔生物科技有限公司：
一、辐射五大服务方向：
国内试剂耗材经销代理；国外试剂订购（直订或境外代理）；基因组测序（二代、二代+三代）；基因分型（SNP检测）：低/中/高通量项目；生物样本运输；
二、多家代理品牌，涉及30多种，经营代理500多个品牌：
MOLTOX、Intact Genomic、Sigma、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific……
所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷门品牌，价格优，货期短，可加急。大部分客户我们提供货到付款服务，上海金畔自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作。
专业订购国内外试剂耗材，常备现货，一手货源，欢迎合作!

体外细胞培养技术——培养基

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体外细胞培养技术——培养基

　　体外细胞培养技术——培养基
　　细胞的体外培养即提取机体组织的某一类细胞，在体外模拟体内环境，使细胞能够生存繁衍的技术。体外细胞培养离不开细胞培养基这一直接生存环境，对于结构复杂的生物而言，许多细胞特别是一些分化程度不高的细胞在脱离机体后是比较易受生存环境的影响而导致变异等情况出现，使得实验失败。因此细胞的培养条件需严格按照标准，满足细胞生长对营养成份、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的需求。那么你知道培养基需要哪些条件吗？让我们一起来看看吧！
　　一、营养成分
　　1.氨基酸
　　蛋白质合成所需的原料。所有细胞都需要12种必须氨基酸：缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、组氨酸、酪氨酸、精氨酸、半胱氨酸。此外还需要谷氨酰胺，它在细胞代谢过程中有重要作用，所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶合成的来源，同样也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物质。
　　2.单糖
　　在培养过程中，细胞可以通过有氧呼吸与无氧呼吸作用对培养基中的单糖进行酵解以获取能量来满足细胞进行正常生理活动的需求，其中以六碳糖为主。六碳糖还是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的重要原料。细胞对葡萄糖的吸收能力最高，半乳糖低。
　　3.维生素
　　主要扮演辅酶、辅基的角色，不可少。生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12都是培养基常有的成分。
　　4.无机离子与微量元素
　　细胞生长除需要钠钾钙镁氮和磷等基本元素，微量元素也是不可少的，如铁、锌、硒、铜、锰、钼、钒等。
　　二、促生长因子及激素
　　越来越多的实验证实各种激素、生长因子对于维持细胞的功能、保持细胞的状态(分化或未分化)具有十分重要的作用。有些激素对许多细胞生长有促生长作用，如生长激素可以促进蛋白质的合成，加强对钠、钙、钾、磷、硫等重要元素的吸收。
　　三、pH
　　大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，培养基偏离此范围便会对细胞将产生有害影响。
　　造成pH波动主要是代谢产生的CO2，在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸，培养基pH很快下降，因此在细胞体外培养过程中pH值是动态变化的。
　　为解决这一问题，培养基应具一定的缓冲能力即每时每刻都需要具备自动调节PH值的能力。合成培养基中使用了NaHCO3-CO2缓冲系统，并采用开放培养的方式，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，在通过稳定调节温箱中CO2浓度(5%)，使之与培养基中的NaHCO3处于平衡状态。
　　四、无毒、无污染
　　体外进行培养的细胞对微生物及一些有害有毒物质几乎没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染(如细菌、真菌、支原体、病毒等)、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染(如抗体、补体)。
　　对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。
　　对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。
　　更多有关培养基的培养条件，请联系上海金畔生物科技有限公司。

T7体外转录试剂盒代理商

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上海金畔生物科技有限公司是T7体外转录试剂盒代理商 ，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
T7体外转录试剂盒

详情介绍

Product Name: T7体外转录试剂盒

INTRODUCTION: 

The T7-FlashScribe™ Transcription Kit is specially formulated to enable users to obtain the maximum  possible yields of RNA from an in vitro transcription (IVT) reaction in just 30 minutes. The standard  30 minute, 20 μl reaction will yield up to 180 μg of RNA from 1 μg of the control template. These yields  are made possible by the high-performance properties of the T7-FlashScribe enzyme. The T7-FlashScribe Transcription Kit produces exceptionally high yields of either long or short transcripts.  The standard reaction can be scaled up to produce milligram amounts of RNA. T7-FlashScribe IVT RNA can be processed into mRNA (5'-end capped and 3'-end poly(A) tailed) through  the use of CELLSCRIPT's ScriptCap™ m7 G Capping System, ScriptCap 2'-O-Methyltransferase Kit and  A-Plus™ Poly(A) Polymerase Tailing Kit (available separately).  CELLSCRIPT also offers the INCOGNITO™ line of transcription kits for the production of pseudouridine- & 5-methyl-cytosine-containing (GA C and GA 5mC) IVT RNA. It has been shown that -mRNAs and  5mC-mRNAs are translated into protein at higher levels and induce lower innate immune responses in  human and other mammalian cells that express various RNA sensors compared to corresponding  unmodified mRNAs.

CELLSCRIPT™体外加帽试剂盒工作原理

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CELLSCRIPT™体外加帽试剂盒工作原理

CELLSCRIPT™的使命是提供安全高效的转录产品和技术，用于制造和使用RNA以便进行临床研究和治疗的细胞翻译。

目前的产品包括多种体外转录试剂盒、加帽类似物或加帽酶的5' RNA加帽试剂盒和3' RNA多聚腺苷酸化的试剂盒，以及用于转录、加帽、poly(A)尾mRNA以进行翻译的多合一试剂盒。

其中，ScriptCap™ Cap 1 Capping System（C-SCCS1710）包含ScriptCap加帽酶、ScriptCap 2'-O-甲基转移酶、GTP和SAM等成分，对体外转录的RNA进行转录后加帽修饰。Cap 0或Cap 1上限均可构建，效率接近100%（这不能通过共转录加帽方法来完成）。

ScriptCap加帽酶在体外催化具有5‘-三磷酸基的初级RNA的5’末端加成帽核苷酸。“帽核苷酸”或“帽”是一种鸟嘌呤核苷，它通过5‘C连接到一个三磷酸基团，然后再连接到初级mRNA转录本中最多的5’核苷酸的5‘碳上，在大多数真核生物中，帽核苷酸中鸟嘌呤7位的氮是甲基化的。表示为：m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3')。其中m7G代表N7-甲基鸟嘌呤核苷，PPP代表帽子核苷的5’碳与初级RNA转录本的第一个核苷酸之间的三磷酸桥，N1(PN)x-OH(3’)代表初级RNA转录本，其中N1是最多的5’核苷酸。

ScriptCap加帽酶可依次催化三种不同的酶反应：

(1) RNA三磷酸酶将RNA的5‘三磷酸裂解成二磷酸：

pppN1(p)Nx-OH(3')——ppN1(pN)x-OH(3') + Pi

(2) RNA鸟苷酸转移酶将GTP连接到RNA最5‘核苷酸(N1)的5’二磷酸上：

ppN1(pN)x-OH(3') + GTP——G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + PPi

(3) 鸟嘌呤-7-甲基转移酶以S-腺苷甲硫氨酸(SAM或ADOMet)为辅因子，催化帽核苷酸中鸟嘌呤7-氮的甲基化：

G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoMet——m7G(5')ppp(5')N1(pN)x-OH(3') + AdoHyc

这一过程被称为“盖帽”，与未盖帽的RNA相比，它提高了RNA的稳定性和翻译效率。ScriptCap盖帽酶构建的封端RNA产物具有“0″帽结构。在体外，通过同时使用ScriptCap 2‘-O-甲基转移酶和ScriptCap盖帽酶，可以将CAP0 RNA转化为“CAP1″结构。

ScriptCap 2‘-O-甲基转移酶通过将供体分子SAM上的甲基转移到CAP 0 RNA倒数第二个核苷酸的2’-O位，从CAP 0-RNA制备CAP1-RNA，合成具有CAP 1结构的RNA。


Cap1 RNA可以进一步提高mRNA的体内翻译效率，并有助于将mRNA标记为相对于细胞内免疫监视机制的“自身RNA”。

ScriptCap1盖帽系统提供了一种在IVT反应中通过共转录盖帽来制造盖帽RNA的替代方案，在IVT反应中，用二核苷酸盖帽类似物(例如m7GpppG)代替部分GTP，如果RNA的5‘末端不是结构化的，使用ScriptCap 1盖帽系统的盖帽效率可以接近100%。相反，由于CAP类似物与GTP竞争RNA聚合酶的转录启动，共转录的盖帽效率受到CAP类似物的浓度及其与GTP浓度之比的限制。因此，在转录反应中使用CAP类似物盖帽的RNA百分比总是小于100%。在使用CAP类似物的共转录盖帽反应中可以产生的CAP RNA的量也受到降低GTP浓度以允许CAP类似物竞争转录起始的需要的限制。另一方面，如果要盖帽的RNA具有高度结构的5‘末端，则与CAP类似物共转录盖帽可能是有益的。

优势：灵活进行cap0和cap1的加帽；

   效率*，接近100％；

   同类产品可直接交叉使用以及价格合适。

应用：进行体外mRNA的修饰，用作体外蛋白表达系统和生理试验；

   前体mRNA的研究试验以及疫苗研究。

人DC细胞体外快速成熟试剂盒

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上海金畔生物科技有限公司提供人DC细胞体外快速成熟试剂盒 ，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
人DC细胞体外快速成熟试剂盒

详情介绍

产品简介

DC细胞通过将特异性抗原提呈给T细胞能够诱导抗原特异性T细胞的大量增殖从而清除携带特异抗原特征的病原体（肿瘤细胞或者病毒等）以达到治疗疾病的目的。人DC细胞体外快速成熟试剂盒仅需4天时间便能将单核细胞（MNC）在体外诱导成熟树突状细胞，比传统DC细胞诱导方法能够节约一半时间。

人DC细胞体外快速成熟试剂盒的优势

 成分明确，无异源成分

无菌、无支原体、低内毒素

仅需4天时间便能将单核细胞诱导成成熟DC细胞

上海金畔生物科技有限公司：

辐射五大服务方向：

国内试剂耗材经销代理；国外试剂订购（直订或境外代理）；基因组测序（二代、二代+三代）；基因分型（SNP检测）：低/中/高通量项目；生物样本运输；

多家代理品牌，涉及30多种，经营代理500多个品牌：

ALZET、Intact Genomic、Sigma、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific……

所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷门品牌，价格优，货期短，可加急。大部分客户我们提供货到付款服务，

上海金畔自成立依靠过硬的服务和良好的信誉与各大企事业单位、科研单位建立长期合作。

专业订购国内外试剂耗材，常备现货，一手货源，欢迎合作。