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EZBioscience microRNA升级版试剂盒
一、试剂盒简介
使用通过大肠杆菌Poly(A)聚合酶将polyA尾添加到miRNA的3'末端的方法来合成miRNA的第一链cDNA。该试剂盒中包含一个正向U6引物和一个通用qPCR反向引物(Universal3'qPCR引物),可用于定量检测所有 miRNA,因此,aPCR反应仅需要每个靶标miRNA的特异性正向引物。该试剂盒包括两个步骤;首先,用
gDNA去除剂外理RNA以消除基因组DNA。然后,在poly(A)拖尾反应中,将polv(A)尾添加到miRNA分子的3'-末端。使用专门设计的Universal RTPrimer进行逆转录反应以生成miRNA的第一条链。
EZBioscience microRNA升级版试剂盒(小)是一种快速逆转录试剂盒,其中包含用于去除基因组DNA的高效DNase。它包含四管试剂:gDNA去除剂,miRNART酶混合物,4xmiRNART缓冲液和Universal3gPCR引物。
其中,gDNA去除剂主要包括浓缩的DNase和缓冲液。它仅需在室温(19~27℃)下反应5分钟,即可降解超过95%的残留基因组DNA,从而大大减少了对结果的干扰。
miRNART酶混合物主要包含大肠杆菌Poly(A)聚合酶,逆转录酶和RNase抑制剂。大肠杆菌Poly(A)聚合酶不仅具有添加polvy(A)尾部的高效率,而且可以特异性识别单链miRNA,从而避免了具有双链结构的
miRNA前休的进一步逆转录反应·突变休M-MIV逆转录酶具有很强的抗手扰能力和扩增能力,并目扩增交
率特别好。
4x miRNA RT Buffer包含用于miRNA聚腺苷酸化和逆转录反应的所有原材料和引物,包括Oligo(dT)-通用标签引物,缓冲液和dNTPs,并且经过仔细优化,以确保同时进行聚腺苷酸化和逆转录。
二、产品组分
三、保存条件 -20℃保存
四、EZBioscience microRNA升级版试剂盒(小)特点
加尾法一步快速高效率将所有miRNA逆转录为可直接检测的cDNA。无需设计miRNA特异性引物,仅需30分钟即可完成microRNA的逆转录,简单高效率。含有通用的反向qPCR引物,可使用常规qPCR试剂。