急性髓系白血病*培养基

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急性髓系白血病*培养基

详情介绍

产品名称急性髓系白血病*培养基Human Acute Myeloid Leukemia Cell Medium)
产品说明急性髓系白血病*培养基Human Acute Myeloid Leukemia Cell Medium)是一种为促进人源急性髓系白血病原代细胞体外牛长而设计的*培基。它是—种无菌的液体混合系统,含有心必需和北心必的氨基粉维生素。有机和无机化合物、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在37℃、5% CO2的培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方,可以提供一个理想平衡的体外培养环境,选择性地促进人源急性髓白血病原代细胞的生长。

产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明:
样品分离
1)使用移液器将抗凝管中的外周血或骨髓样本混匀,转移至15mL无菌离心管中,1500rpm离心5min。
2)弃血浆,向血细胞沉淀中加入3~5倍1×PBS稀释至9mL,充分混匀。
3)另取15mL离心管,加入6mL人外周血淋巴细胞分离液,倾斜缓慢地加入上述稀释的血细胞沉淀,与分离液明显分层,设置转速400g、升速2、降速0、温度25℃,离心30min 。
4)离心后,离心管中由上至下细胞分四层(PBS层、环状乳白色细胞层、分离液层、红细胞层),移液器环形吸取白细胞层至预先加入5 mL1×PBS的15mL离心管中,轻轻混匀洗涤细胞,1500rpm室温离心3min。
5)弃上清,加入6mL红细胞裂解液重悬细胞沉淀,4 ℃裂解15~20min,中间颠倒混匀一次,1500rpm室温离心3min。
6)弃上清,加入1~5mL*培养基重悬细胞沉淀,活细胞计数后(细胞活率至少>50%),并参考表1,接种活细胞于培养瓶/板,置37℃、5%二氧化碳培养箱中培养。

细胞传代
1)镜下观察细胞形态,待悬浮细胞长满至80%~90% 时即可传代。
2)将细胞悬液转移至15mL离心管,1500rpm室温离心3min。
3)弃上清,以1~2mL培养基重悬细胞,活细胞计数,并参考表1,接种活细胞于培养瓶/板,置37℃、5%二氧化碳培养箱中培养。
注意事项:
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.原代细胞培养期间尽量避免频繁摇晃,显微镜观察原代细胞状态尽量避免摇晃细胞培养器皿。
3.使用本品急性髓系白血病原代细胞比例越高(至少>30%),培养成功率越高。4.使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
5.本产品中含有血清和原代细胞专用抗生素,如无特别需要不用额外再添加血清和双抗,可直接使用。
6.为保持本产品的理想使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。7.请于保质期内使用本产品,超出保质期,必须放弃使用。
8.本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。