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原代胃癌*培养基

产品名称：原代胃癌*培养基（Human Gastric Carcinoma Cell Epithelial Cell Medium）
产品说明：原代胃癌*培养基（Human Gastric Carcinoma Cell Epithelial Cell Medium）是一种为促进胃癌原代细胞体外生长而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系，在5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时，pH值为7.4。该培养基的配方，可以提供一个理想平衡的营养环境，选择性地促进体外人胃癌原代细胞的生长。

产品优势：
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明：
◉使用前准备
（1）DMEM/F12培养基稀释后的基质胶（Corning#356231）（100倍稀释）。
（2）15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。
（3）提前30min从4℃冰箱取出*培养基平衡至室温。
◉胃癌原代细胞培养
（1）至少提前半小时使用稀释后的基质胶预铺培养瓶/板，使用前吸干基质胶，用稀释液润洗一遍。
（2）将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO2条件培养。
（3）原代细胞初次接种后2-3天内勿动（利于细胞贴壁），第一次换液建议换半液。

◉胃癌原代细胞传代
（1）镜下观察细胞形成克隆，且汇合度达到80~90%时即可传代。
（2培养箱中取出细胞，弃旧培养液，加入适量0.05%胰酶，37 ℃孵育，5min后拿出轻拍培养瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。
（3）细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm, 3min。
（4）弃上清，以1-2mL*培养基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板，补加*培养基至所需体积，轻轻摇晃混匀，表面消毒后置培养箱，37℃、5%CO2条件培养。其他步骤同上。
注意事项：

1. 本产品在使用前需平衡至室温。

2. 使用产品时应注意无菌操作，避免污染。

3. 本产品中不含血清，含有原代细胞专用抗生素，不用额外再添加双抗，可直接使用。

4. 为保持本产品的理想使用效果，不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。

5. 请于保质期内使用本产品，超出保质期，必须放弃使用。

6. 本产品仅用于科研用途，不能用于体外诊断。

7. 建议使用术中样本以获得最大培养成功率。