磁性微球相比琼脂糖微球的蛋白纯化的优势

免疫沉淀、ChIP、蛋白互作、亲和纯化等实验里,核心的环节就是用微球进行目标蛋白的钓取纯化 ,而常用的就是各种包被的琼脂糖微球,而随着大家对回收率、纯度以及实验便捷性的要求提升,越来越多的人开始选用磁性微球。

磁性微球相比琼脂糖微球的优势:

回收率高

琼脂糖纯化中,琼脂糖珠在离心之后,弃去上清。在吸液过程中,为了尽可能移去上清,往往会吸走一部分琼脂糖,这样就可能损失一部分目的蛋白。同时,琼脂糖珠在离心过程中也可能破裂,这样就又损失了一部分目的蛋白。

磁珠纯化中,携带目的蛋白的磁珠通过磁性吸附在管壁上,此时吸取上清不会捎带走带有目的蛋白的磁珠,而磁珠也不需要应付颇具考验的离心步骤,这样双管齐下就保证了磁珠比琼脂糖珠有更高的回收率,对于蛋白互作、ChIP实验来说,更容易获得可靠的检出结果。而对于RIP这样对于检测灵敏度要求更高的实验来说,基于磁珠的纯化是唯一推荐的途径。

磁性微球相比琼脂糖微球的蛋白纯化的优势

特异性好

琼脂糖纯化中,琼脂糖珠本身结构比较复杂,容易非特异性结合蛋白和DNA,对于蛋白互作研究或者ChIP实验产生非特异性的干扰。此外,在离心去除上清的过程中,也可能由于吸取上清不彻底,从而残留一些实际未与微球结合的蛋白/DNA,从而产生非特异性结果。

磁珠纯化中,由于磁珠表面光滑,非特异性结合率极低,因此背景比琼脂糖低的多。另外由于磁珠纯化时,去除上清更加彻底,残留的未结合蛋白/DNA对结果的干扰也能被去除。

磁性微球相比琼脂糖微球的蛋白纯化的优势

琼脂糖微球的非特异性结合

琼脂糖天然的非特异性结合属性往往会给实验带来意想不到的背景,需要精确设置多个对照和反复实验来进行核实与验证。而对于ChlP实验来说,也不能直接使用普通琼脂糖珠,而是需要先用鲑鱼精DNA等试剂进行封闭

 

操作简便速度快

IP实验中,琼脂糖珠、抗体、目标蛋白往往需要很长时间的孵育才能充分进行结合。而使用磁珠后,往往只需要更短的时间就可以完成充分的结合,这极大的提升了实验速度。

同时,磁珠无需进行离心,可以使用磁力架进行“秒速”分离,可以迅速进行后续的去上清、清洗步骤。再也不用盯着琼脂糖珠的固液界面小心翼翼的进行上清分离了。

 磁性微球相比琼脂糖微球的蛋白纯化的优势

金畔供应

基础磁珠 二氧化硅磁珠
琼脂糖磁珠
聚合物磁珠
葡聚糖纳米磁珠
标记免疫与捕获磁珠 生物配体快速偶联磁珠
免疫沉淀试剂盒
链霉亲和素磁珠
蛋白纯化磁珠 抗体纯化磁珠
His-tag蛋白纯化磁珠
GST融合蛋白纯化磁珠
Strep-tag II蛋白纯化磁珠
肝素磁珠
DEAE磁珠
核酸提取磁珠 游离DNA提取试剂盒
唾液基因组提取试剂盒
粪便核酸提取试剂盒
血液基因组提取试剂盒
病毒DNA/RNA提取试剂盒
DNA片段筛选
PCR产物纯化试剂盒
凝胶回收试剂盒
质粒DNA小量抽提试剂盒
Oligo dT磁珠

上述产品与各种相关复杂定制,金畔生物均可供应,仅用于科研!

wyf 02.01