点击化学DBCO修饰蛋白/多肽/糖肽/小分子/抗体
点击化学(Click chemistry)，又译为"链接化学"、"速配接合组合式化学
二苯并环辛炔（ADIBO，DBCO）是用于应变促进的炔叠氮化物环加成（spAAC）（一种无铜Click化学反应）的最具反应性的环炔。
这是一种胺反应性NHS酯，可将反应性部分轻松连接至几乎任何伯或仲胺基团，例如蛋白质，肽或小分子胺基团。
DBCO立即与叠氮化物反应。该反应速率远高于铜催化的反应速率以及与许多其他环辛炔的反应速率。与某些其他环辛炔不同，DBCO不与四嗪发生反应-这允许叠氮化物与DBCO和反式环辛烯与四嗪进行正交共轭。
基于叠氮-炔环加成反应的点击化学，被广泛应用于有机化学、药物化学、化学生物学、分子生物学、细胞生物学等多学科领域。铜催化叠氮-炔点击化学反应是一类高效的生物正交反应，但铜催化体系在生物体系中具有较差的生物相容性。环张力炔基如DBCO、BCN等可以在无铜催化的温和条件下实现叠氮-炔基的环加成，极大地促进了点击化学在活生物体系中的应用。
环张力炔基DBCO结构可以在酸性条件下重排丧失其点击化学反应活性。通过研究发现，银试剂AgNTf2或AgOAc可以在中性条件下促进DBCO快速重排生成四环产物，并且当反应体系有胺类化合物时，会发生转酰胺反应，形成新的酰胺产物。在此过程中，银试剂催化转酰胺反应具有“笼缚”酰化试剂属性：无催化剂条件下其酰化活性“束缚”在DBCO“笼状”结构中，而在银催化下从“笼”中释放其酰化能力。在与叠氮基团的竞争反应中，银试剂催化转酰胺反应效率远高于叠氮点击化学反应，酰化产物产率高达95%。我们选择了不同的含有氨基的小分子化合物、多肽、糖肽、蛋白、糖蛋白等，对该反应进行了底物反应活性和选择性的探索。
研究发现，银催化条件下，DBCO可以快速的酰化氨基官能团；针对三种包含20种天然氨基酸的多肽底物的研究发现，DBCO酰化反应高选择性地发生在Lys的氨基上，而不影响其他氨基酸。同时，银催化DBCO酰化反应可以高效地修饰糖肽、BSA蛋白、糖蛋白RNase B和IgG抗体等，表现出较好的底物适用性。
二：原理
点击化学反应主要有4 种类型
1.环加成反应
2.亲核开环反应
3.非醇醛的羰基化学
4.碳碳多键的加成反应
目前文献报道广泛应用的点击反应(click reaction)是通过Cu ( Ⅰ ) 催化，炔基与叠氮基发生环加成反应，生成区域选择性的1,4-二取代-1,2,3-三氮唑，其反应机理如图 所示
三：反应特征
1. 反应原料容易得到
2. 对于氧气、水不敏感
3. 产率相对较高
4. 产物的立体选择性好
上海金畔生物提供如下几类DBCO偶联试剂
DBCO胺反应试剂和DBCO-PEG试剂：
DBCO-C6-NHS Ester
DBCO-NHS Ester
DBCO-Sulfo-NHS Ester
DBCO-PEG4-NHS Ester
DBCO-STP Ester
DBCO-PEG5-NHS Ester
DBCO-PEG5-TFP Ester
DBCO Acid
DBCO-C6-Acid
DBCO-PEG5-Acid
PC DBCO-NHS Ester
DBCO Amine
DBCO-PEG4-Amine
Sulfo DBCO-Amine
Sulfo DBCO-PEG4-Amine
Bis-sulfone-PEG4-DBCO
DBCO Maleimide
DBCO-PEG4-Maleimide
Sulfo DBCO-Maleimide
Sulfo DBCO-PEG4-Maleimide
DBCO-PEG-MAL
DBCO-PEG-COOH
DBCO-PEG-NH2
DBCO-PEG-Biotin
DBCO-PEG-Silhaie
DBCO-PEG-SH
DBCO生物素反应试剂:
Biotin-PEG4-DBCO
WS Biotin DBCO
Dde Biotin DBCO
Disulfide Biotin DBCO
Desthiobiotin-PEG4-DBCO
Diazo Biotin DBCO
PC DBCO Biotin
DBCO-Sulfo-Link-biotin
Disulfide Biotin DBCO
Desthiobiotin-PEG4-DBCO
Diazo Biotin DBCO
PC DBCO Biotin
WS Biotin DBCO
DBCO-Sulfo-Link-biotin
Diazo Biotin-PEG3-DBCO
Dde Biotin-PEG4-DBCO
PC DBCO-PEG3-biotin
WSPC Biotin-PEG3-DBCO
N-(DBCO-PEG4)-N-Biotin-PEG4-NHS
DBCO标记荧光探针
BCO-Cyhaiine3
DBCO-Cyhaiine3.5
DBCO-Disulfo-Cyhaiine3
DBCO-trisulfo-Cyhaiine3.5
DBCO-Cyhaiine5
DBCO-Cyhaiine5.5
DBCO-Disulfo-Cyhaiine5
DBCO-trisulfo-Cyhaiine5.5
DBCO-Cyhaiine7
DBCO-ICG
DBCO-trisulfo-ICG
AFDye 405 DBCO
AFDye 430 DBCO
AFDye 488 DBCO
AFDye 532 DBCO
AFDye 546 DBCO
AFDye 555 DBCO
AFDye 568 DBCO
AFDye 594 DBCO
AFDye 647 DBCO
Cy3 DBCO
Cy5 DBCO
Cy5.5 DBCO
Cy7 DBCO
MB 488 DBCO
MB 543 DBCO
MB 594 DBCO
MB 660R DBCO
MB 680R DBCO
TAMRA DBCO
小分子DBCO产品：
DBCO-PEG4-NHS Ester
DBCO-PEG5-NHS Ester
DBCO-PEG5-TFP Ester
DBCO-PEG4-Amine
Sulfo DBCO-PEG4-Amine
Bis-sulfone-PEG4-DBCO
Biotin-PEG4-DBCO
Desthiobiotin-PEG4-DBCO
DBCO-PEG4-DBCO
DBCO-PEG4-OH
DBCO-C4-COOH
Sulfo DBCO-PEG4-Maleimide
DBCO-PEG4-Maleimide
DBCO-PEG5-Acid
DBCO-C6-Acid
DBCO-NHCO-PEG13-acid
DBCO-PEG8-NHS ester
DBCO-PEG2-PFP ester
DBCO-C2-alcohol
DBCO-C2-PEG4-amine
DBCO-C3-PEG4-amine
DBCO-PEG1-NH-Boc
Bromoacetamido-dPEG®₁₂-amido-DBCO
Biotin-dPEG®₁₂-DBCO
Bromoacetamido-dPEG®₂₄-amido-DBCO
m-dPEG®₁₂-DBCO
DBCO-dPEG®₂₄-amido-dPEG®₂₄-DSPE
DBCO-dPEG®₂₄-MAL
DBCO-dPEG®₂₄-TFP ester
DBCO-dPEG®₁₂-meso-TP-IR775
N-(DBCO-PEG4)-N-Biotin-PEG4-NHS
N-DBCO-N-bis(PEG2-acid)
N-DBCO-N-bis(PEG2-NHS ester)
DBCO-C6-Acid
DBCO-PEG5-Acid
DBCO Amine
DBCO-PEG4-Amine
DBCO Maleimide
DBCO-PEG4-Maleimide