SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下,SYBR Green I发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强。因此,SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。
基本参数
【中文名】SYBRGREENⅠ核苷酸胶体染料
【中文同义词】SYBRGREEN1荧光染料/SYBRGREENⅠ核苷酸胶体染料/SDNA核苷酸染液/GREEN-DNADYE核苷酸胶体染料;SYBR绿色II核苷酸胶体染料;核苷酸胶体染料;SYBRGREEN1荧光染料;SYBR绿色IDNA染色液;GREEN-DNADYE核苷酸胶体染料;SDNA核苷酸染液;SYBRGREENⅠ核苷酸胶体染料
【英文名】SYBR Green I
SYBRGREENⅠ核苷酸胶体染料物理化学性质
【分子式】C32H37N4S
【分子量】509.727
【结构式】
【质量】509.273346
【PSA】 44.35000
【LogP】5.42750
【特点】
高灵敏:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:无须脱色或冲洗。
适用范围广:可适用于多种电泳分析。
使用方便:不影响其它修饰酶作用。
经济:价格比银染便宜。
【使用方法】
预染方法
1. 该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
2. 工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的SYBR GreenⅠ稀释100倍,即为SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3. 制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
4. 样品染色:向分析样品中加入SYBR GreenⅠ工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使SYBR GreenⅠ与样品中DNA充分结合。SYBR GreenⅠ工作液加入量为总上样量的1/10。
5. DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混匀,室温放置5分钟,使SYBR GreenⅠ与DNA充分结合。
6. 上样、电泳:按常规操作。
7.检测:用ABLUe可见光核酸检测仪器检测
后染方法
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH 7.0 – 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000:1的比例稀释SYBR GreenⅠ浓缩液,混匀,制成染色溶液。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
4. 用ABLUe观测。蓝光可透过玻璃,观测聚丙烯酰胺凝胶时,可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入ablue内观测。
CDP Star 160081-62-9
CSDP 142456-88-0
(4-氯苯巯基)(10-甲基-9,10-二氢化吖啶亚甲基)磷酸二钠盐/APS-5 193884-53-6
吖啶盐(NSP-SA-NHS) ?199293-83-9
吖啶酯(NSP-DMAE-NHS) 194357-64-7
AMPPD系列
SYBR Green I 163795-75-3?
PICO Green 177571-06-1
3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐(CHAPS) ?75621-03-3
2-丁酮酸钠盐;2-羰基丁酸钠盐;a-丁酮酸钠盐 2013-26-5
β-雌二醇-3-(β-D-葡萄糖苷酸)钠盐 14982-12-8
TOOS 82692-93-1
N-(2-羟基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺钠盐 82692-88-4
磷酸烯醇式丙酮酸单环己胺盐 10526-80-4
4-硝基苯基磷酸双[三(羟甲基)甲胺]盐水合物 68189-42-4
4-甲基香豆素基-α-D-唾液酸钠盐 76204-02-9
甘油-L-脯氨酸 704-15-4
(4-硝基苯基)-Α-D-麦芽六糖苷 74173-30-1
2-氯-4-硝基苯-α-半乳糖-麦芽二糖苷
2-氯-4-硝基苯基 2-(乙酰氨基)-2-脱氧-BETA-吡喃葡萄糖苷 103614-82-0
6-甲基-2-吡啶基 2-(乙酰氨基)-2-脱氧-1-硫代-BETA-D-吡喃葡萄糖苷 149263-94-5
10-(羧甲基氨基羰基)-3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪钠盐 115871-18-6
4-氨基-3-肼-5-巯基-1,2,4-三唑(AHMT) 1750-12-5
N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺/异鲁米诺AEBI/异鲁米诺 66612-29-1
8-苯氨基萘-1-磺酸铵盐(ANS-NH4) 28836-03-5
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