外泌体概要
外泌体（Exosome）是指经由细胞内的囊泡运输，从多泡体(Multivesicular body，MVB) 排出到细胞外的直径为30～100 nm左右的细胞外囊泡（Extracellular vesicle，EV）。
外泌体的膜表面上多表达一种四次跨膜蛋白（Tetrasphaiin），已知CD9与CD63分子为一般外泌体的标志物。外泌体内部含有蛋白质、脂质、核酸等。被分泌到细胞外后，经由血液、尿液和唾液等体液被相邻或远离的组织吸收，从而发挥着细胞间信息传递载体的作用。
最近的研究证明外泌体中存在miRNA后，外泌体由来的miRNA的分析与细胞、组织特异性、以及与疾病间的联系引起了人们的广泛关注。现在，在以癌症等为代表的各类疾病中，利用外泌体由来的分子开发诊断试剂或将其作为药物开发靶点，或是将外泌体作为药物释放系统的工具加以利用，这些聚焦于外泌体的研究正在不断发展。
外泌体的分离方法
超速离心法
多聚物沉淀法
免疫沉淀法
方法
• 利用分子的大小比重物理法离心
• 使用多聚物的沉淀法
• 运用磁珠法特异性吸附外泌体表面抗原进行沉淀分离
优点
• 至今为止常用的方法
• 可大量提取
• 可使用的样品种类较多
• 低成本
• 操作简单
• 时间较短
• 不需要特别的仪器
• 操作简单
• 时间较短
• 杂质较少，纯度高
• 可以使用膜上蛋白对应的特异性抗体进行回收
缺点
• 操作比较繁杂，时间较长（半天～两天）
• 杂质较多
• 根据使用的离心管的材料，可能会因壁上的吸附造成损耗
• 较难同时检测不同样品
• 需要超速离心机
• 杂质较多
• 从血清血浆中回收外泌体需要分别使用不同的试剂进行回收
• 外泌体的回收效果依靠抗体的性能
