DiO(细胞膜绿色荧光探针),cas34215-57-1的操作指南

DiO(细胞膜绿色荧光探针)

产品介绍Neuro-DiO 是一种代替膜绿色荧光染料DiO 的新型染料,DiO 由于其溶解度低、易形成聚合物和横向扩散速度缓慢等缺点,很难用于神经元和细胞悬液的研究。Neuro-DiO和 DiO 具有几乎相同的吸收光谱和发射光谱,但前者具有更好的膜溶解性,并且不形成非荧光性的聚集体

产品参数: 

外观:可溶于乙醇、己烷、DMSO 或植物油的橙黄色固体 

λEx/λ Em(MeOH) = 484/501 nm 

贮存条件:4℃ 避光保存 

保质期:12 个月 

分子式:C16H17Cl2N5 

分子量:1086 

产品描述:DiO是一种亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构进入细胞膜后,DiO在整个细胞膜上扩散,佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,DiO被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的 FITC滤光片检测。DiO通常不会明显影响细胞的生存力(viability),因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

DiO(细胞膜绿色荧光探针),cas34215-57-1的操作指南

产品性质

同义名

DiOC18(3)DiO perchlorate

Cas No.

34215-57-1

分子式

C53H85ClN2O6

分子量

881.7

Ex/Em

484/501 nm

推荐滤光器

XF23-Omega, 31001-Chroma

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品-20 ºC干燥避光保存,有效期一年。

使用方法

1. 染色液制备

1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。

注意:未使用的储存液保存在-20℃,分装保存,避免反复冻融。

2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 μM的工作液。

注意:工作液终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可从推荐浓度的十倍以上找佳条件。

2. 悬浮细胞染色

1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。

2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞佳培养时间不同。

3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。

4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。

5)重复(3),(4)步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞佳培养时间不同。

5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。

4. 显微镜检测

1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。

2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005

5. 流式细胞仪检测

染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。

注意事项

1)         荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)         为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


cas34215-57-1 DiO 细胞膜绿色荧光探针

3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯并恶唑-2-亚基)-1-丙烯-1-]苯并恶唑高氯酸盐

细胞膜绿色荧光探针(DIO)

DIO高氯酸盐

DIO细胞膜荧光探针绿色

DID高氯酸盐

DIO(细胞膜绿色荧光探针)

3,3`-双十八烷基氧碳花菁高氯酸盐

3,3'--N-十八烷基氧代羰花青高氯酸盐

3,3-dioctadecyloxacarbocyhaiine

N,N'-DIOCTADECYLOXACARBOCYANINEPERCHLORATE

NK3045

DIOC18(3)

DIO

D275

BENZOXAZOLIUM,3-OCTADECYL-2-[3-(3-OCTADECYL-2(3H)-BENZOXAZOLYLIDENE)-1-PROPENYL]-,PERCHLORATE

BENZOXAZOLIUM,3-OCTADECYL-2-[3-(3-OCTADECYL-2-BENZOXAZOLINYLIDENE)PROPENYL]-,PERCHLORATE

DiO荧光染料

DiO波长

DiO说明书

DiO染料 pH稳定性

DiO激发波长

DiO染料颜色

dio染料配制1mM