Elabscience Caspase 1活性检测试剂盒的原理与注意事项

Elabscience®自主研发的 Caspase 1 Activity Assay Kit 采用分光光度法，可用于检测细胞、组织裂解液或其它样本的caspase 1活性。Caspase 1 也称 interkeukin 1β conberting enzyme (ICE)，是caspase 家族中唯yi可以剪切 IL-1β 前体蛋白或 IL-18 前体产生相应成熟的细胞因子的 caspase。那么你知道Elabscience Caspase 1活性检测试剂盒的原理与注意事项吗？让我们一起来看看吧！

一、检测原理

Elabscience Caspase 1活性检测试剂盒是基于 caspase 1 可以催化底物Ac-YVAD-pNA 产生黄色的 pNA (p-nitroaniline)，pNA 在 405nm 附近有强吸收，从而可以通过测定吸光度来检测 caspase 1 的活性。

二、保存条件

-20°C 可保存一年。Ac-YVAD-pNA (4 mM)应适当分装并避光保存，避免反复冻融。

三、注意事项

1. 所有待检样本都需检测蛋白浓度，由于样本裂解液中含有还原剂，不适合使用 BCA 法进行蛋白浓度测定，推荐使用考马斯亮蓝法（Bradford 法）。

2. 建议在正式实验前，选择2~3个预期差异大的样本进行预实验，若样本吸光值超过标准曲线的测量范围，则需稀释样本或者调整上样量再进行测定。

3. 进行caspase 1活性测定的样本，其蛋白浓度应在1~4 mg/mL，否则会影响实验结果的准确性。

4. 一次实验的细胞数目建议不低于 1×106个，组织样本不低于50mg，以便达到1~4 mg/mL的蛋白浓度。否则会影响实验的精准度，导致蛋白浓度过低，反应体系内活性 caspase 1过少而OD值偏低。

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