重点推介:Meridian可风干尿液直扩qPCR/RT-qPCR预混液(MDX150/MDX151)
迈迪安推出的Air-Dryable™ 可风干尿液直扩qPCR/RT- qPCR预混液是专门为直接从高浓度尿液中快速灵敏地扩增DNA/RNA设计的抗抑性配方,其高灵敏度甚至可以检测出通常需要验血才能检测到的虫媒病毒,如基孔肯雅病毒。在使用时只需要将引物和探针添加到可风干预混液中,再分装到反应容器中(例如:PCR管)进行干燥即可。检测时,只需要将患者尿液样本直接加入干燥后的预混液中,无需核酸提取即可进行检测。
Air-Dryable™ 可风干尿液直扩 qPCR /RT-qPCR 预混液是不含甘油、含有优化的风干赋形剂、可兼容风干的核酸检测试剂,是专门针对尿液样本直接扩增设计的配方,可通过风干建立常温稳定型qPCR/RT-qPCR检,适用于从尿液样本免核酸提取的DNA 和RNA直接扩增。可直接检测尿液样本中低浓度细菌和无细胞核酸,适用于单重或多重检测,还可兼容不同风干条件。
分别使用风干后的可风干尿液直扩qPCR预混液(红色)、KAPA Probe Force(Roche, 绿色)和Ultraplex™(QuantBio,灰色)对25%人体尿液样本中的淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和B族链球菌(GBS)靶标进行三重扩增。 结果显示,与对比试剂相比,干燥后的可风干尿液直扩qPCR预混液对25%人体尿液样本具有更高效的多重扩增和灵敏度。
更快速获得测试结果
A)分别使用标准扩增循环和快速扩增循环对25%人体尿液样本中的淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和B族链球菌(GBS)靶标进行三重扩增。标准循环:95°C5分钟,95°C10秒,60°C30秒,40个循环;快速循环:95°C3分钟,95°C1秒,60°C1秒,40个循环。
B)分别使用标准扩增循环和快速扩增循环对5%人体尿液样本中的3个哺乳动物RNA靶标进行三重扩增。标准循环:逆转录10分钟,95°C10秒,60°C10秒,40个循环;快速循环:逆转录5分钟,95°C1秒,@60°C1秒,40个循环。所有反应在Quantstudio™7FlexReal-TimePCR仪上进行。结果显示,可风干尿液直扩qPCR/RT-qPCR预混液可在最快速反应条件中给出快速优异的扩增结果,并且灵敏度和重现性均不受影响。
将可风干尿液直扩qPCR/RT-qPCR预混液干燥后进行加速热稳定性实验。试剂干燥后(红色)在 37C 保存1个月,与新鲜液体试剂(黑色)对比,样本为30%人体尿液。结果表明,经过加速稳定性测试,风干混合物在环境温度下保持了充分的活性,预计稳定性大于12个月。
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