细胞培养的常见问题及解决方法
你知道细胞培养的常见问题及解决方法吗?让我们一起来看看吧!
一、培养细胞不贴壁
原因:
1.胰蛋白酶消化过度;
2.支原体污染;
解决方法:
1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度;
2.分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物;
二、悬浮细胞成簇
原因:
1.培养液中含钙,镁离子;
2.支原体污染;
3.蛋白酶过度消化使得细胞裂解;
解决方法:
1.用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞,轻巧吹吸
2.细胞获得单细胞悬液;
3.分离培养物,检测支原体;
三、培养细胞生长缓慢
原因:
1.由于更换不同培养液或血清;
2.培养液中一些细胞生长必须成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏;
3.培养物中有少量细菌或真菌污染;
解决方法:
1.比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验,让细胞逐渐适应新培养液;
2.换入新鲜配置培养液,或补加谷氨酰胺及生长因子;
3.用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物;
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