如何检测细胞凋零？

细胞凋亡是程序性细胞死亡的高度调控形式，在多细胞生物发育过程中、整个生命周期以及对细胞应激作出反应时均可发生细胞凋亡。核固缩、细胞皱缩、质膜出泡和 DNA 断裂是细胞凋亡的典型特征。那么你知道如何检测细胞凋零吗？让我们一起来看看吧！

一、对细胞悬浮液进行 Annexin V 染色后，通过流式细胞仪可以有效地识别细胞凋亡早期脂质双层的变化。但是，这种检测不太适合完整的组织标本，否则结果难以量化和解释。

二、其他细胞凋亡标记，如 Cleaved Caspase-3 和核酶多聚二磷酸腺苷核糖 (ADP-ribose) 聚合酶 (PARP)，更适合用传统的免疫组织化学方法在组织切片中检测。

三、使用 DNA 染料染色（例如 DAPI 和 Hoeschst 33342）来观察染色质凝聚。

四、使用末端脱氧核苷酸转移酶介导 dUTP 缺口末端标记法 (TUNEL) 检测以及其他亚细胞定位标记（包括 细胞色素 C 从线粒体到细胞质的转位）确定 DNA 链断裂和碎片裂解。

五、线粒体膜电位是细胞健康状态的关键指标，其损耗与非活性、功能失调的线粒体，因此，它是细胞凋亡的早期指标，可以在与细胞可渗透阳离子染料 TMRE（四甲基罗丹明乙酯）孵育后进行检测。TMRE 通常在健康完整线粒体中累积，因此，当线粒体膜电位被破坏时，荧光强度降低。

六、生长因子和细胞因子通过PI3K/Akt 途径诱导的信号转导会导致促凋亡的 Bcl-2 家族成员 Bad、Bax、caspase-9、GSK-3 和 FoxO1 的磷酸化和抑制，以及抗细胞凋亡蛋白如 Bcl-2 的上调。

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