你知道常用的双染显色系统有什么吗?
免疫组化双染技术是常用的免疫组化方法之一,它可以通过使用两种不同种属的一抗、两种不同种属的二抗系统和不同颜色的显色系统,同时检测组织切片中两种或多种抗原的表达情况。那么,目前常用的双染显色系统有什么呢?让我们一起来看看吧!
一、辣根过氧化物酶(HRP)检测系统
辣根过氧化物酶(HRP)是一种能将过氧化氢(H2O2)分解为氧气(O2)和水(H2O)的过氧化物酶。HRP可以使用DAB作为氢供体,H2O2作为底物,最终产生棕黄色的抗原-抗体结合的产物。
二、碱性磷酸酶(AP)检测系统
DAB在临床应用中也有局限性。当内源性过氧化物酶活性较高或黑色素含量较高时,DAB不是最jia选择,应采用其他显色剂或碱性磷酸酶。例如,在黑色素瘤的免疫组化诊断中,DAB显示的棕色沉淀物与黑色素瘤表达的HMB45(或S-100)在颜色上难以区分。如果黑色素颗粒较多,很难判断结果。因此,在富含黑色素的肿瘤中,使用红色着色剂有助于更清楚地确定阳性染色。AP系统使用固体红、固体蓝或BCIP/NBT作为着色剂。固红染色阳性结果为红色,固蓝、BCIP/NBT为蓝色。
AP
AP催化固体红显色反应,将萘酚AS-MX磷酸水解为萘酚。萘酚与固体红发生偶联反应,在AP活性中心形成红色不溶性沉淀。苏木精免疫组化染色时,双染色系统固定效果较好。一是结合牢固,二是易于与DAB和苏木精鉴别。
免疫组化双染技术的结果须建立在对阳性对照切片、阴性对照切片成立的基础上,进行染色结果的判读。更多有关免疫组化双染显色系统的相关产品,请联系上海金畔生物科技有限公司: