美国avivasystemsbiology抗体常用的抗体纯化方法及其相关原理
美国avivasystemsbiology抗体是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个*特征,该外来目标被称为抗原。
我们知道,一般免疫血清中含有特异性抗体和非特异性抗体,血清蛋白以及其他各种杂蛋白等,在制备特异性抗体过程中当抗体的效价达到实验预期之后,我们所制备的美国avivasystemsbiology抗体的纯度关键取决于所选择的纯化方法。
美国avivasystemsbiology抗体常用的抗体纯化方法及其相关原理。
1、沉淀法:
硫酸铵/辛酸沉淀法是纯化抗体传统的方法之一,被广泛用于血清和腹水抗体的浓缩和粗纯,此方法可大规模粗纯抗体,但纯化后纯度不高,还需配合其它方法继续纯化。通常是将饱和硫酸加入血清或腹水中,将抗体沉淀下来,然后在溶解沉淀继续下一步的纯化。辛酸沉淀抗体通常要先将腹水或血清的pH调4.8,然后缓慢的滴加辛酸,是蛋白沉淀,抗体在上清中,上清继续下一步的纯化。
2、离子交换层析:
离子交换层析也常用于抗体的纯化,通量大,工业上用离子交换层析成本低,主要用于除去非抗体蛋白,及用亲和层析纯化时混入的ProteinA/G等亲和填料脱离的配基,内毒素的去除等。离子交换纯化时,根据抗体的pI选择合适的离子交换类型,在pI未知时可以分别用阴阳离子交换填料去试验。