Elabscience一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒(E-CK-A423)现货供应
产品简介:
Elabscience® One-step TUNEL Flow Cytometry Apoptosis Kit 是一款灵敏度高且能快速简便地检测细胞凋亡的产品。本试剂盒可通过流式细胞仪来进行悬浮细胞、贴壁细胞的流式凋亡检测。
检测原理:
细胞在发生凋亡时,会激活一些特异性的 DNA 内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组 DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段,在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp的阶梯状迁移。细胞经过固定破膜后,TdT 酶 (脱氧核糖核酸末端转移酶)将荧光标记的 dUTP 连接到细胞断裂DNA暴露的3'-OH 末端,通过流式细胞仪检测dUTP偶联物发出的荧光信号,从而来检测晚期凋亡。
保存条件:
-20°C 保存,保质期一年。Labeling Solution 需避光保存,Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer 需避免反复多次冻融,建议分装保存。
常见问题及解决方法:
1. 细胞碎片较多
可能原因:
固定不充分,破膜导致细胞破碎。破膜时间过久,破膜温度较高。
解决方法:
适当延长固定的时间,充分固定细胞后再破膜。破膜时间应控制在 10 min,最长不超过 15 min,保证在冰上破膜。
2. 未检测到凋亡细胞群
可能原因:
细胞诱导凋亡失败。细胞数目较多,细胞透膜不che底。用含有EDTA 等蝥合剂的试剂洗涤细胞,导致 TdT 酶失效。
解决方法:
设置不同的浓度梯度和诱导时间,找到合适的诱导条件。
适当调整细胞数量,或增加Permeabilization Bufer 的剂量,合理充分破膜。
使用不含螯合剂的洗涤液。
产品选购:
货号 |
产品名称 |
规格 |
E-CK-A423 |
一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒(Blue,Elab Fluor® Violet 450) |
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