克隆了一种编码horikoshii焦球菌udp -葡萄糖4-异丙基酶(pgal)的基因,并在大肠杆菌中进行了表达。
纯化后的酶可可逆催化UDP-Gal和UDP-Glc的合成,但对UDP-Gal结合的选择性提高了约10倍。
最佳pH值和温度分别为6.5℃和65℃。该酶在没有添加烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的情况下有效,可能是由于存在紧密结合的NAD+。
特别是,pGALE可以与堀越菇的海藻糖合成酶(TreT)结合,从UDP再生UDP- gal。
糖基转移酶可能的副产物UDP可与海藻糖经TreT转化为UDP- glc,而pgal可同时将UDP- glc转化为UDP- gal。
综上所述,pGALE和TreT加海藻糖是一种有效的一锅两酶系统,可再生半乳糖基转移酶的高成本底物UDP-Gal,完成一个糖核苷酸循环。
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