UDP糖|底物动力学及底物对大麦udp -葡萄糖焦磷酸化酶四级结构的影响

UDP-Glc焦磷酸化酶(UGPase)是产生UDP-Glc的一种必需酶,它被用于数百个糖基化反应,包括向各种化合物添加Glc。本研究从大麦UGPase的底物对蛋白质活性和四级结构的影响等方面对其进行了表征。


其与Glc-1-P和UTP的Km值分别为0.33和0.25 mM。除以Glc-1-P作为底物外,该酶对Gal-1-P也具有相当的活性;然而,Gal-1-P的Km值非常高(>10 mM),使这种反应在生理条件下不太可能发生。


无论反应方向如何,UGPase的最适pH值都较宽,为6.5-8.5。酶的平衡常数为0.4,表明该反应对Glc-1-P的合成方向略有偏好。


通过气相电泳迁移大分子分析(GEMMA)研究,酶的四级结构受单个或两个底物在反应的任意方向的添加的影响,导致UGPase二聚体向单体转移,这是酶的活性形式。


底物诱导的酶的四级结构的变化可能有调节作用,以确保最大的活性。讨论了影响UGPase齐聚状态的动力学和因素。

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