Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒样本如何处理?

Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒样本如何处理?

Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒采用分光光度法,可用于检测细胞、组织裂解液或其它样本的 caspase 2 活性。那么你知道Elabscience Caspase 2活性检测试剂盒样本该如何处理吗?让我们一起来看看吧!

1. 细胞样本

按照常规方法收集细胞沉淀,PBS 重悬细胞并计数,600×g 离心 5 min,弃上清,按照每 100 万细胞加入 100 μL Cell Lysis Buffer 的比例加入预冷的 Cell Lysis Buffer 重悬细胞, 在冰浴条件下裂解 30 min,裂解期间需涡旋震荡 3~4 次,每 10 s。裂解后的样本,于 4°C11000 ×g 离心 10~15 min 小心地吸取上清至新的 EP 管中,并置于冰上待用。同时使 Bradford 法(E-BC-K168-M)测定蛋白浓度。 注:检测贴壁细胞时,需收集诱导后产生的悬浮细胞,并与 后续收集的贴壁细胞一起检测。

2. 组织样本

50 mg 待测组织样本,用 PBS 或者生理盐水清洗 1-2 次, 去除组织中残留的血细胞,用手术剪剪碎,加入 200 μL 预冷 Cell Lysis Buffer,进行匀浆(在冰浴条件下进行,若组织 质量加倍时,加入的预冷 Cell Lysis Buffer 也需加倍)。将匀 浆好的样本转移至 1.5 mL 离心管中,冰浴裂解 30 min。裂解 后的样本,于 4°C11000×g 离心 10~15 min,小心地吸取上 清至新的 EP 管中,并置于冰上待用。同时使用 Bradford E-BC-K168-M)测定蛋白浓度。 注:制备好的样本应立即测定,若无法及时测定,可将裂解 后的上清保存在-80°C2 周内进行检测。

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